文章来源于公众号：of studies             作者：of studies

我们所熟知的CART细胞自相残杀大多发生在CD7、CD38这种血液肿瘤相关靶点中，今天看到JHO新发的一篇文章是关于避免CD276 CART自相残杀的，很有趣。

CD276在小细胞肺癌SCLC等实体瘤中高表达，这项研究发现T细胞激活及CAR信号会诱导CAR-T细胞自身也表达CD276，导致自相残杀（fratricide），从而限制抗CD276 CAR-T细胞的扩增与活性。

所以他们提出了一种避免自相残杀的策略，可以一起看下。

1、CD276是小细胞肺癌理想靶点

• 79 例原发瘤 RNA-seq：CD276 表达显著高于 DLL3。
• 四种分子亚型（SCLC-A/N/P/Y）细胞系均高表达 CD276，而 DLL3 表达不均。
• 流式证实 4 株 SCLC 细胞系表面 CD276 高阳性。
• 组织芯片（TMA，39 例）IHC：71.8% 样本高表达 CD276（H-score 量化）。

体外扩增Ad CART培养时不添加AM，无靶抗原刺激，避免 CAR-T 被激活或耗竭，也消除自相残杀风险。可获得更高产量、更“年轻”的记忆表型（TCM/TSCM）细胞产品。

体内给药时引入 AM，注射 AM 后形成“AdCAR-T + AM”复合物，连接肿瘤细胞并触发杀伤。

Fab适配分子AM 停药后，快速清除，AdCAR-T 进入“休息”期，减少持续信号导致的耗竭。

可调给药方案（间歇/持续），根据肿瘤负荷设计每日、隔日或“4-天给药/3-天停药”等方案，平衡疗效与T细胞持久性。实现“远程遥控”式的开关控制，提高安全性。

另外这个方案还有多靶点与序贯切换能力，通过更换 AM（不同 Fab）即可快速切换靶抗原，无需重新制备 CAR-T。为抗原异质性或复发后抗原逃逸提供“现成”解决方案。这个策略也是可以应用到血液瘤的CD7的

dCAR-T（直接抗 CD276）体外扩增 6 天细胞数显著低于 AdCAR-T 或未转导 T 细胞。

激活的 AdCAR-T 中 15–20% 表达 CD276，主要见于 CD4+亚群。

重复刺激实验显示，CAR 信号本身可再次上调 CD276。

用 CD276 Fab 或全长 mAb 处理 AdCAR-T后，死细胞↑、激活标志↑，证实自相残杀机制。

3、新型 Fab-AM 的筛选与体外功能

人源 scFv 噬菌体库 → 亲和力成熟 → 5 个先导 Fab-AM（AM14/19/24/34/46）。

EC50 27–41 pM；AM46 杀伤 SHP-77 最优且可持续 3 轮再挑战（192 h）。

对 RH30、IMR-32、DMS114 等多系同样有效；细胞因子分泌无异常升高。

获得了高亲和力、可量产、功能强的 AM46，用于后续体内实验。

4、AdCAR-T + AM46 体内控制 SCLC 进展

NSG 小鼠尾静脉 SHP-77-luc 模型中，dCAR-T 初期减瘤但迅速复发；

AdCAR-T 仅在有 AM46 时显著抑制肿瘤并延长生存。

AM46 存在时 AdCAR-T 早期扩增，停药后仍能被再次激活并清除二次攻击瘤。

5、优化给药方案

6、IL-18 装甲增强 AdCAR-T 功能


IL-18 装甲通过增强 CD4⁺ 存活与记忆分化，进一步提升 AdCAR-T 的持久与再扩能力。

小结
AdCAR-T平台可在不靶向CD276的情况下实现T细胞扩增，新型CD276靶向AM在体外和体内均显示出对SCLC的强效杀伤作用。与传统CD276-CAR-T相比，间歇性AM给药可使AdCAR-T在体内保持功能持久性。此外，通过在AdCAR-T中引入激活诱导、AM远程控制的IL-18分泌，可进一步增强其体内扩增与抗肿瘤活性。