想不想像控制开关一样，随心所欲地在特定时间、特定组织里“打开”或“关闭”某个基因？CreERT2与Flox小鼠这对“黄金搭档”就让这变成了现实，它们已成为探索基因功能的标配工具（原理可查看：小鼠大学问 | Cre-Lox系统核心原理全解析）。然而，理想很丰满，现实却常卡在第一步：当你花费数月培育出珍贵的实验小鼠，却可能在他莫昔芬（Tamoxifen）溶解这一步就犯了难——后续的给药剂量、频率和方式，每一步都有不少萌新“翻车”。本期，小编就化身“通关指导员”，带你搞定他莫昔芬给药的那些事儿。

1 他莫昔芬的配置和储存
他莫昔芬在水中的溶解度极低，常规操作中需使用玉米油作为溶剂进行配制。建议将其配制为终浓度20mg/mL的溶液，并于37℃条件下振荡过夜，以确保充分溶解或均匀悬浮。为提高配制成功率并维持体系稳定性，单次配制体积建议控制在50mL以内。配制完成后，应将溶液分装为1mL/管，并于-20℃、避光条件下保存。使用时需注意避免反复冻融，在规范存储条件下，溶液可保存一个月，推荐现配现用以获得最佳效果。

在整个配制和储存过程中，必须严格进行避光操作，因为他莫昔芬对光敏感，光照可能影响其稳定性。以下为他莫昔芬和玉米油的常用品牌示例，仅供参考：
Tamoxifen(Sigma‐Aldrich)：CAS # 10540-29-1
玉米油 (Sigma‐Aldrich) CAS# 8001-30-7

2 他莫昔芬的给药方式
他莫昔芬可以通过腹腔注射、灌胃、饮食或饮水等途径给药，应用最广泛的是腹腔注射给药，腹腔注射的给药剂量精准，便于控制。

腹腔注射：正确抓取小鼠，将小鼠的鼻子朝向地面，露出腹部；定位动物的中线并将腹部分成四个象限，特别是动物的右下象限，是腹腔注射的合适位置（右下象限缺少重要的解剖结构）；多次腹腔注射时，应交替注射部位。

灌胃：给药剂量和频率与腹腔注射相同，在正式实验前，建议同学们先反复练习，熟练掌握灌胃给药的技巧。

饮食/饮水给药使用较少，主要是他莫昔芬水溶性差，小鼠的给药剂量不好量化，且需要的诱导时间较长（一般需要几周进行诱导），在诱导期间往往还伴随着小鼠体重的下降（约10-15%）。

3 他莫昔芬的给药方式
对于4周龄级以上的成年小鼠，他莫昔芬的推荐剂量为75mg/kg-120mg/kg。一般注射3-5次，隔天一次。由于小鼠体内各组织诱导效率有所差异，通常我们建议先以120mg/kg，注射5次进行实验，以尽可能保证敲除的效果。幼鼠注射剂量建议控制在100mg/kg以下；孕鼠及老龄鼠（大于6月龄）的剂量也需要适当减少，具体参考如下^[1]：

*由于他莫昔芬会影响胎儿发育和生产，建议同时注射孕酮来减少流产概率。

4 其它注意事项

1. 他莫昔芬注射完成后不建议立刻开展实验，一般来讲，停药后需要继续饲养7天，再安排后续实验。
2. 对照组小鼠需要同步进行不含他莫昔芬的玉米油溶液给药。
3. 未处理的小鼠需要和注射他莫昔芬的小鼠分笼饲养，小鼠舐舔到他莫昔芬悬液，梳毛等行为可能导致意外敲除。
4. 加热不会导致他莫昔芬失效，37℃过夜溶解他莫昔芬是没有问题的。

最后，需要特别强调的是，最佳的给药方案（包括剂量、频率和途径）会受到实验设计、小鼠品系以及目标组织器官等多种因素的综合影响。因此，上文所述的方法仅为一般性参考框架，面对具体实验时，同学们还应根据参考文献、实验经验先进行预实验，以确定最佳方案。

Reference：
[1] Feil S, Valtcheva N, Feil R. Inducible Cre mice. Methods Mol Biol. 2009;530:343-63. doi:10.1007/978-1-59745-471-1_18. PMID: 19266339.

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