通过下一代技术监测记忆B细胞ImmunoSpot@ 提供对体液免疫的洞察，而循环抗体检测无法揭示这一点

摘要
记忆B细胞(Bmem)在特异性抗原刺激下提供适应性体液宿主防御的第二道防线。抗体首次遇到障碍时重新发起挑战，保持连贯性响应，失败。这是一种情况，因为文翻泽显，季节性流感的发病率很高。虽然在这些情况下，可能会发生再感染，但在两种情况下，原有的Bmem迅速参与召回反应仍然可以提供免疫保护。众所周知，Bmem在宿主防御中起着关键作用，但它们的评估尚未成为标准免疫监测的一部分。在这里，我们描述了新一代的B细胞ELISPOT/FluoroSpot(统称为lmmunoSpot)方法，适用于在单细胞分辨率下解剖体外Bmem谱系，揭示其免疫球蛋白类/亚类利用情况及其对原始病毒和变异病毒/抗原的亲和分布。 由于此类全面的 B细胞免疫斑点·}检测仅需极少的细胞样本即可进行且具有可扩展性和可靠性，因此它们非常适合用于常规的免疫监测。

引言
临床免疫诊断目前仅限于检测血清和其他体液中的特异性抗体。目前，通过血清抗体滴度的测量，可以推断出一个人是否感染了某种病毒或接种了某种疫苗并随后产生了免疫力，以及随之而来的免疫反应的程度。在本章中，我们将描述为什么有必要将记忆B细胞（Bmem）测量纳入这些考虑，以及如何通过执行B细胞ELISPOT/FluoroSpot（统称为“ImmunoSpot®”）检测，以最小的细胞材料和劳动力可靠地实现这一点（见注1）。迄今为止，对抗原特异性Bmem监测的主流努力尚未得到充分实施，这有其概念和实际原因。也就是说，抗体滴度测量直接反映Bmem频率已经被广泛接受。这个概念是基于一个过时的假设，即在B细胞对抗原的反应过程中，长寿命的Bmem和长寿命的浆细胞（PC）以固定的比例出现。因此，人们认为利用脆弱活细胞材料检测Bmem的繁琐测试是不必要的，因为血清中稳定蛋白的简单测量可以可靠地提供所需的信息。然而，最近对B细胞谱系分化途径的理解进展意味着需要一种不同的方法。这个主题最近已经成为几篇精彩评论的主题[1—3]，仅在下节中简要概述........

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