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流式细胞术样本制备从PBMC到组织解离标准化方案

2026-04-01     来源:本站     点击次数:29

做流式细胞术实验,样本制备是绝对的第一步,也是最关键的一步!很多人实验结果差、细胞分群不清晰、分选纯度低,追根溯源,都是样本制备环节出了问题。

一、流式样本制备的核心流程:从取材到上机的完整链路
不管是血液样本还是组织样本,流式实验的样本制备都遵循一套标准化的核心流程,每个环节环环相扣,直接影响最终实验结果:
1,取材:从实验动物或人体获取新鲜的血液、组织等样本
2,单细胞悬液制备:将样本处理成单个细胞的悬液(流式实验的基础,必须保证细胞分散、无团块)
3,磁珠孵育:用特异性磁珠标记目标细胞,为后续细胞分选做准备
4,润洗分选柱:预处理分选柱,保证细胞分选的效率和纯度
5,上样:将处理好的细胞悬液加入分选柱
6,吸附、洗脱:让目标细胞结合在分选柱上,洗去杂细胞,再洗脱得到高纯度的目标细胞
7,流式鉴定:用流式细胞仪验证分选后细胞的纯度和活性
8,细胞培养:将纯化后的细胞进行后续的培养、功能实验等

二、外周血样本制备:PBMC 分离的标准化方案
外周血是免疫实验、流式检测最常用的样本类型,我们常说的PBMC(外周血单个核细胞),是从外周血中分离得到的淋巴细胞、单核细胞等的统称,是绝大多数流式免疫实验的核心样本。

1. PBMC 分离金标准:Ficoll 外周血淋巴细胞分离液
分离 PBMC 的经典方法是密度梯度离心法,核心试剂就是 Ficoll 分离液(产品编号:abs930)。
这款试剂是行业公认的金标准,引用文献超过 200 篇,可靠性拉满!利用不同细胞的密度差异,离心后血液自然分层,轻松提取高纯度、高活性的 PBMC,规格有 200ml/2000ml 可选,满足从小试到大规模实验的不同需求。

2. 样本保存解决方案:外周血保存液
如果遇到样本不能及时处理、需要长途运输的情况,外周血保存液(abs90134)就是你的救星!
用它可以让全血在 2-8℃环境下保存 7-15 天,最大程度维持细胞活性,避免样本浪费,完美解决样本延迟处理的痛点。

三、组织样本制备:从组织块到单细胞悬液的 7 步标准化流程
做组织样本的流式实验,最大的难点就是把组织块处理成合格的单细胞悬液:消化不足会有细胞团,堵塞流式管路;消化过度会导致细胞大量死亡,直接影响实验结果。
优宁维为大家整理了标准化的组织样本单细胞悬液处理流程,7 步轻松搞定:
1,样本取材:无菌条件下快速获取目标组织,保证样本新鲜
2,组织保存:若无法及时处理,用合适的保存液维持细胞活性
3,机械 + 酶消化:用机械剪切配合特异性酶消化,将组织块分解为单个细胞(核心步骤)
4,筛网过滤:过滤掉未消化完全的组织块,得到纯净的单细胞悬液
5,预富集 / 梯度密度离心(Percoll):去除红细胞、死细胞,富集目标细胞,提升细胞纯度
6,质控:检测细胞活性、浓度,确保符合流式上机要求
7,细胞冻存:用 DMSO 冻存试剂 + 冻存袋,长期保存细胞,方便后续实验

四、不用自己摸条件!验证过的组织解离试剂盒,开箱即用
很多科研人员在做组织消化时,都会遇到 “消化条件难摸、结果不稳定” 的问题,优宁维为大家准备了经过严格验证、标准化的组织解离试剂盒,开箱即用,不用自己优化条件,省心又高效:
小鼠组织系列:覆盖小鼠肿瘤、肝脏、肺脏、肠道、心脏、肾脏、胰腺、脾脏、脑组织等几乎所有常用组织,规格 10T/25T/30T 可选,满足不同实验规模
人源组织系列:Human 肿瘤组织解离试剂盒,专门适配人源肿瘤样本的单细胞悬液制备
所有试剂盒都配套标准实验 Protocol,还有 100 套样本制备知识库做支撑,帮你轻松搞定不同组织的样本制备,实验结果稳定可重复,大幅提升实验效率。

五、优宁维一站式样本制备解决方案:全链路支持你的流式实验
优宁维作为生命科学一站式供应商,不仅有齐全的样本制备试剂(分离液、保存液、解离试剂盒等),更有完整的技术支持,帮你全流程无忧:
标准化的实验 Protocol,新手也能快速上手
100 + 样本制备知识库,覆盖不同样本、不同组织的处理方法
专业的技术团队,随时解答实验问题
旗下 uFLOW 流式专家、斯达特抗体等品牌,覆盖流式实验全流程试剂需求
整合 60 + 国际知名品牌与 5 + 自主品牌,提供全面、专业、安全、便捷的科研服务
真正实现 “买流式产品找小优,流式实验不用愁”,帮你从样本制备到流式实验全流程省心省力。
名称 货号 规格
人淋巴细胞分离液 abs930-200ml 200ml
大鼠/小鼠肿瘤组织解离试剂盒 abs50090-10T 10T
小鼠肺脏组织解离试剂盒 abs50092-10T 10T
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