文献信息
宁波大学附属李惠利医院完成的研究成果“Integrating metabolomics and network pharmacology to study the mechanism of Er-Xian decoction in improving intervertebral disc degeneration”（整合代谢组学与网络药理学探究二仙汤改善椎间盘退变的作用机制）在《JOURNAL OF ETHNOPHARMACOLOGY》杂志上发表。平生公司的离体CT（VENUS）在论文中提供新西兰大白兔脊椎的图像和定量分析。

本研究的通讯作者为陈斌辉教授，第一作者为王晓博。

文献摘要

民族药理学相关性

椎间盘退变（IDD）是椎间盘（IVD）结构与功能进行性衰退的病理过程，核心表现为细胞外基质过度分解，进而造成蛋白多糖与水分持续流失、椎间盘组分异常，最终引发退变。二仙汤（EXD）作为经典中药复方，具有调和阴阳、补益肝肾、活血化瘀之功效；现有药理研究证实，二仙汤可调控抗氧化与内分泌代谢、维持机体免疫平衡、改善微循环。

研究目的

明确二仙汤干预治疗椎间盘退变的药效作用。

材料与方法

采集二仙汤干预的椎间盘退变模型兔血清，开展代谢组学分析；结合代谢组学与网络药理学数据，预测其作用机制。采用白介素-1β（IL-1β）诱导髓核细胞（NPCs）构建体外椎间盘退变模型，设置二仙汤联合抑制剂干预组别。通过CCK-8实验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、流式细胞术、免疫组化、蛋白免疫印迹（Western blot）及免疫荧光染色，探究二仙汤对髓核细胞的保护作用及分子机制。

研究结果

体内实验证实，二仙汤可抑制炎症反应、恢复椎间盘高度、改善兔椎间盘退变。代谢组学联合网络药理学分析显示：二仙汤主要通过调控关键信号通路发挥治疗作用；其活性成分（脱水淫羊藿素、β-谷甾醇、山奈酚、槲皮素、豆甾醇）可与通路核心靶点强效结合。体外验证表明，二仙汤可下调炎症因子水平、抑制髓核细胞凋亡，上调关键蛋白表达。

结论

二仙汤可通过调节髓核细胞代谢与炎症应答，进而延缓椎间盘退变进程。

实验方法

动物模型

本研究选用雌性新西兰大白兔24只，开展二仙汤（EXD）体内药效评价。

实验兔子随机分为四组，每组6只：空白对照组、椎间盘退变模型组（IDD，每日给予生理盐水）、IDD + 二仙汤高剂量组（EXD-H，每日给药7.6 mL/kg）、IDD + 二仙汤低剂量组（EXD-L，每日给药3.8 mL/kg）；总计18只兔子用于构建椎间盘退变模型。全程无菌操作：经耳缘静脉注射麻醉兔子；于腹部正中切开10 cm切口，将肠道及腹腔内脏脏器轻柔牵移至右侧，钝性分离腹膜后组织并保护血管；充分暴露L4/5节段椎间盘，使用21G穿刺针平行于终板，向纤维环内刺入5 mm，将针体旋转360°后拔出，该穿刺操作重复3次。

造模穿刺完成后，将肠道与内脏脏器复位至腹腔，对切口逐层缝合、规范包扎。术后连续3日于大腿肌肉注射青霉素，预防切口感染。

Micro-CT分析

采用高分辨率显微CT系统（VENUS^® Micro CT，平生医疗科技有限公司）进行离体检测，设置管电压90 kV、管电流50 μA。后续使用Avatar 1.6.3软件（平生医疗科技有限公司）完成三维重建。选取目标椎间隙作为感兴趣区（ROI），开展包括椎间盘高度检测在内的定量分析；以椎间盘高度指数（DHI）作为评价椎间盘高度变化的量化指标。

实验结果

由于髓核（NP）水分流失、纤维环受损，椎间盘整体高度会发生降低，进而导致脊柱稳定性下降。显微CT结果显示：模型组（IDD）椎间盘高度较空白对照组显著降低；经二仙汤（EXD）干预后，该退变特征得到明显逆转（图 1D）。

图 1 二仙汤（EXD）可有效改善兔椎间盘退变（IDD）(D) 显微 CT（Micro‑CT）影像学检测。

实验结论

本研究结合代谢组学分析、网络药理学及多项实验，系统阐明了二仙汤（EXD）干预椎间盘退变（IDD）的治疗作用。研究证实，二仙汤可通过调节髓核细胞的代谢与炎症反应，进而延缓甚至逆转椎间盘退变进程。本研究结果为二仙汤用于临床治疗椎间盘退变提供了理论支撑。

使用设备

 
Micro CT（型号：VENUS）（平生医疗科技）
 影像软件：Avatar（平生医疗科技）