背景
胆管癌(cholangiocarcinoma)作为一种发病率与死亡率持续攀升的致命恶性肿瘤,正日益受到全球关注。大量证据显示,HMGB1 在癌症进展中扮演关键角色,其亚细胞定位变化更是化疗耐药的重要驱动机制。
泰国Naresuan大学团队其研究聚焦胆管癌患者组织中HMGB1的表达特征,并深入探讨其如何调控癌细胞的增殖、迁移、侵袭以及对化疗药物的敏感性。结果揭示:HMGB1 是驱动胆管癌恶性生物学行为的核心因子,有望成为新型诊断标志物。更重要的是,靶向抑制HMGB1 或可有效逆转耐药,显著改善患者治疗结局。
为了精确捕捉HMGB1 敲低后癌细胞真实的动态变化,本研究采用了先进的Celloger® 活细胞成像系统,实现了培养箱内无扰动、长时间、实时多位置延时成像。这一技术让研究者得以直观记录细胞迁移路径、侵袭行为及药物处理后的实时响应,为HMGB1 在胆管癌中的功能机制提供了高分辨率、可量化的动态证据。
这项研究不仅加深了对HMGB1 在胆管癌中作用的理解,更为开发新型靶向干预策略带来了新希望。
Celloger® Mini Plus 活细胞成像仪实验方法(划痕-伤口迁移实验)
研究团队采用经典划痕-伤口(scratch-wound)模型评估HMGB1对细胞迁移的影响:
- 将KKU-213AL5细胞以4 × 10⁵ cells/well密度接种于6孔板,37°C、5% CO₂培养至90%–100%汇合。
- 转染siHMGB1或阴性对照siRNA,6小时后用200 μL移液器尖端在孔中央制造线性划痕。
- 更换新鲜完全培养基,继续培养。
- 关键工具:Celloger® Mini Plus 活细胞成像系统置于培养箱内,自动对焦、明场模式下,通过扫描软件预设在0、6、12、24小时多时间点自动采集多视野高分辨率图像,生成时间序列视频,实现真正非侵入式、实时动态监测。
该方法避免了传统显微镜需反复取出样本导致的污染和环境波动,确保细胞在生理条件下持续观察。

图1. HMGB1抑制显著抑制胆管癌细胞生长、迁移和侵袭
(图C由Celloger Mini Plus拍摄的划痕实验时间序列图像,也可直接生成高清时间序列视频)
结果
- 迁移抑制显著:HMGB1沉默组迁移速率较对照组显著降低(p = 0.0004),24小时内划痕闭合面积明显减少。Celloger® Mini Plus捕获的时序图像直观显示:对照组细胞快速向划痕中央爬行并填充;而沉默组细胞迁移迟缓,边缘不规则,充分证明HMGB1对胆管癌细胞迁移的驱动作用。
- 侵袭、增殖及耐药同步改善:Transwell实验显示侵袭细胞数减少(p < 0.0001);克隆形成能力下降;对吉西他滨(Gemcitabine)和顺铂(Cisplatin)的细胞毒性显著增强。
- 机制层面:Western Blot 证实HMGB1沉默下调p-Akt、p-Erk及cyclin D1表达;STRING分析显示HMGB1与NF-κB、MAPK、PI3K/Akt等通路直接交互。
这些结果不仅验证了HMGB1的促癌功能,更借助Celloger® Mini Plus 的实时成像数据,首次以动态可视化方式呈现其对迁移的调控,为后续机制研究和药物筛选提供了直观证据。
Celloger® Mini Plus 产品优势
Celloger® Mini Plus 是康和达推出的紧凑型自动化活细胞成像系统,在本研究中展现出无可替代的优势:
- 培养箱内实时监测:体积仅长 358 mm × 宽 215 mm × 高 226 mm,重量5.6 kg,可直接放入标准CO₂培养箱,实现长时间、无扰动观察,避免反复开关箱门导致的温度、CO₂波动和污染风险。
- 自动化多点成像:全电机化XYZ平台,镜头移动,支持多达384孔板的多位置成像,自动聚焦+手动对焦+明场/单色荧光(绿/红),轻松完成时间序列视频生成。
- Z-Stack多焦面成像:可捕捉不同焦平面,确保复杂3D结构或厚样本的清晰成像。
- 高兼容性与用户友好:兼容各种培养器皿(孔板、培养瓶、皿),直观软件界面,操作简便,适合高通量实验。
- 实验效率与数据质量双提升:在本研究中,Celloger® Mini Plus 精准记录了0–24小时迁移动态,为量化分析提供高清、可重复的图像数据,显著缩短了传统手动拍摄的时间并提高了结果可靠性。

(Celloger® Mini Plus 实机图:紧凑设计、培养箱内放置、软件界面实时显示)
总结
Celloger® Mini Plus 以“培养箱内实时成像”为核心竞争力,帮助研究团队在生理条件下捕捉细胞迁移的每一刻变化,为胆管癌机制研究提供了强大技术支撑。无论是基础科研、药物筛选还是细胞治疗工艺开发,它都是高效、可靠的活细胞成像首选。
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参考文献:
Jiraviriyakul, Arunya et al. “Higher expression of high-mobility group box 1 in cholangiocarcinoma and association with cell growth, in vitro migration and invasion, and chemo-drug sensitivity.” Science progress vol. 108,3 (2025): 368504251362343. doi:10.1177/00368504251362343