胶原酶 III 型(CAS:9001-12-1,货号 abs47048002)是组织解离实验常用的蛋白水解酶,依托独特酶学特性,成为原代细胞制备领域的核心试剂。本文结合酶学定义、分型差异与实操场景,系统介绍该试剂的技术要点。
什么是胶原酶 III 型?
胶原酶是特异性降解胶原纤维的肽链内切酶,可识别胶原特有的 Pro-X-Gly-Pro 序列并切割肽键,也是少数能分解三股螺旋天然胶原纤维的蛋白酶。胶原酶 III 型源自溶组织梭菌,为复合酶制剂,活性≥125 units/mg,次级蛋白酶杂活低,酶体系更纯净,外观呈棕褐色粉末,常规 2-8℃干燥储存即可,-20℃可长期保存两年。
不同类型胶原酶如何区分?
商业化胶原酶依据酶组分与活性分为五类,分型差异决定适用场景。
对比来看,III 型核心优势是酶体系纯净,优先用于对蛋白酶敏感的组织样本。
胶原酶 III 型适用于哪些实验?
该试剂标准工作浓度为 50-200 U/ml,依托低杂酶特性,核心应用于乳腺组织原代细胞分离,也可用于结缔组织温和解离、器官灌注取材等实验。实验操作分为储存液配制、组织消化、细胞收集三步,37℃孵育 4-18 h,添加 3 mM CaCl₂可提升消化效率,全程需无菌操作,避免酶液反复冻融。
胶原酶III主流实验应用:乳腺组织、组织解离、器官灌注、原代细胞制备、结缔组织消化、活体组织取材
实验条件:37℃、添加CaCl₂、无菌操作
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