酶是人类基因组中最大的药物靶点超家族之一，作为细胞信号传导的关键调控分子，通过磷酸化参与调控细胞增殖、代谢、免疫等多种生命活动，其异常表达或激活与肿瘤、自身免疫病、炎症等疾病密切相关。目前已有 101 款激酶抑制剂获 FDA 批准上市，战略价值凸显。详见图1，FDA批准的激酶抑制剂按年份和治疗领域分类。

图1 FDA批准的激酶抑制剂按年份和治疗领域分类

(Nat Rev Drug Discov. 2025 Nov 13)

传统激酶活性检测方法存在诸多局限性，如Elisa方法操作繁琐、无法满足高通量需求；ATP消耗法对低活性激酶的检测盲区及多步骤操作导致实验误差等，都直接影响激酶相关的研究。瑞孚迪(Revvity) 的HTRF/LANCE 均相检测技术，提供覆盖丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶的活性检测方案，可实现快速、微量、高通量的激酶抑制剂筛选与活性评价，大幅缩短实验周期、降低操作误差，为激酶靶点药物研发提供高效可靠的工具支撑。

1HTRF KinEASE检测原理

KinEASE激酶活性检测基于时间分辨荧光共振能量转移技术，采用通用型生物素化丝氨酸/苏氨酸激酶 (STK) 或酪氨酸 (TK) 底物与链霉亲和素-XL665受体结合。当激酶催化底物磷酸化后，供体铕穴状化合物标记的磷酸化特异性抗体识别并结合磷酸化位点，形成"供体-底物-受体"三元复合物；在320/340nm激发光作用下，供体产生的620nm发射光通过能量转移激发受体发出665nm的信号，665/620的信号与底物磷酸化水平成正比。

图2 HTF RKinEASE原理图

KinEASE™是用于筛选丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶活性的通用平台，目前超过180种丝氨酸/苏氨酸激酶和 95 种酪氨酸激酶已使用HTRF KinEASE试剂盒进行了验证。KinEASE可以提供包括酶浓度，孵育时间，ATP的Km值，Kinase Buffer，酶浓度梯度与时间动力学以及阳性化合物的IC50等验证数据。

图3 已使用 HTRF KinEASE 试剂盒进行验证的激酶 (瑞孚迪)

图4 EGFR激酶的KinEASE验证数据

2LANCE® Ultra激酶检测原理

LANCE® Ultra激酶活性检测与KinEASE原理类似，是基于时间分辨荧光共振能量转移技术。不同的是LANCE® Ultra采用Ulight直标的底物。当激酶催化底物磷酸化后，供体铕螯合物标记的磷酸化特异性抗体识别并结合磷酸化位点，形成"供体-底物-受体"三元复合物；665/620的信号与底物磷酸化水平成正比。

图5 LANCE® Ultra原理图

LANCE® Ultra与HTFR KinEAS平台互补，LANCE Ultra最多可提供激酶与三个底物的S/B数据，助力研究者找到适合激酶检测的最佳解决方案。目前225 种丝氨酸/苏氨酸激酶和85 种酪氨酸激酶已使用LANCE Ultra进行验证。

图6 LANCE® Ultra验证数据（部分）

产品列表(部分)

▶ 丝氨酸/苏氨酸激酶活性检测试剂盒

▶ 酪氨酸激酶活性检测试剂盒

MTO定制化服务

除此之外，我们还提供定制化开发服务，如CDKs 激酶活性检测试剂盒覆盖 CDK1、 CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK9、CDK12 等多个细胞周期相关激酶，可直接检测激酶活性，适用于激酶抑制 剂筛选、选择性评估和机制研究。

▶ CDK激酶活性检测试剂盒