一、何为无外泌体胎牛血清?
无外泌体胎牛血清是经多级超速离心联合纳米过滤工艺制备的专用细胞培养血清,可去除 95% 以上血清内源牛源外泌体,同时完整保留生长因子、氨基酸、激素等细胞增殖必需营养组分。常规胎牛血清天然富含 30–150nm 牛源囊泡,携带牛源蛋白、miRNA,会混入细胞上清干扰内源外泌体检测;无外泌体胎牛血清标志物 CD63 含量低于 3.125pg/mL,大幅降低外源背景干扰,兼顾培养稳定性与实验纯净度。

(无外泌体胎牛血清制工艺备示意图)
二、无外泌体血清与普通胎牛血清核心差异体现在哪里?
二者基础营养组分一致,核心区别集中于外泌体含量与实验适配性。普通胎牛血清未做囊泡去除处理,上清分离外泌体时会叠加牛源囊泡,造成 NTA 定量偏高、WB 标志物杂带、测序混入异种 RNA;无外泌体胎牛血清在去除囊泡的同时维持细胞倍增时间<18h、克隆形成率>80%,细胞增殖、贴壁状态与常规血清无显著差异,仅消除外源囊泡干扰,不损伤细胞培养性能。

三、哪些实验场景需要选用无外泌体胎牛血清?
其一,外泌体分离与鉴定实验,包含 NTA 粒径定量、透射电镜形态观察、CD9/CD63/TSG101 蛋白 WB 检测;
其二,外泌体功能机制研究,如肿瘤细胞囊泡介导迁移、干细胞旁分泌通讯、免疫细胞胞外囊泡调控实验;
其三,外泌体转录组 / 蛋白组测序,避免牛源核酸、蛋白污染测序文库;
其四,囊泡标志物筛选与疾病微环境体外模型构建。常规细胞增殖、传代培养无外泌体检测需求时,可选用普通胎牛血清。

四、使用无外泌体血清有哪些关键技术注意事项?
血清反复冻融后易析出微量蛋白结晶,进行 NTA 囊泡定量检测前,可通过低速离心去除沉淀,该处理不会影响血清细胞培养活性;细胞培养阶段,待细胞融合度达到 60%–70% 时更换无外泌体血清完全培养基,上清收集培养时长建议控制在 24–48 h,降低细胞凋亡碎片带来的检测背景干扰;操作全过程需遵循无菌规范,合格无外泌体血清均经过支原体、外源病毒、内毒素多重质控,可适配肿瘤细胞、间充质干细胞、上皮细胞等多种常用细胞系,有效提升平行实验结果重复性。
Absin无外泌体胎牛血清,专为外泌体研究设计,由健康胎牛血清无菌采集,经过多级过滤+特殊膜过滤工艺处理,去除96%以上的胎牛血清内源外泌体(去除后CD63<3.125pg/ml),具有无支原体,无内毒素,批次稳定统一等特点。
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