细胞背景与来源
研究血脑屏障（BBB）的同学对 bEnd.3 应该不陌生，它是用得最多的小鼠脑微血管内皮细胞系之一。相比原代脑微血管内皮，它的好处是能稳定传代、来源可控，做 BBB 通透性、内皮功能、神经炎症的体外实验很方便。
bEnd.3 是小鼠脑微血管内皮细胞，从患内皮瘤小鼠的脑组织分离，经含多瘤病毒中 T 抗原的逆转录病毒（TKmT）转染永生化。它表达 vWF、能摄取荧光标记的 LDL，内皮特性明确，主要用于神经科学和血脑屏障研究，也适合 3D 培养。

 
来源：小鼠，脑微血管内皮，永生化。贴壁生长，低密度时形态不规则，长满后形成均匀单层、呈漩涡状排列，偏纤维细胞样。
应用场景与研究价值

• 神经科学/血脑屏障：体外 BBB 模型，研究药物跨膜转运、屏障通透性。
• 炎症：对 TNF-α、IL-1、LPS 有时间/浓度依赖的响应，能诱导 MAdCAM-1、E-selectin、ICAM-1、VCAM-1、P-selectin 等粘附分子，适合做内皮炎症与白细胞黏附研究。

培养特性与注意事项
培养基：DMEM + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁生长，但复苏后恢复慢（约一周），建议高密度冻存。
传代：PBS 润洗后用 0.25% 胰酶消化，显微镜看到细胞间隙变大、部分脱落即终止；900 rpm 离心 3-5 min，首次传代 1:2。换液 2-3 天一次。
冻存：程序性冻存液（或 92% FBS + 8% DMSO），程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴至米粒大小冰块，150g 离心 1-2 min，重悬接种。
生物安全：BSL-1。注意：对血清质量敏感，一定要用品质稳定、验证过效果的血清；传代久了（超过 30 代）部分粘附分子表达会变，做相关实验记得盯代数。
bEnd.3 对血清敏感这点挺折腾人，自己试血清容易浪费时间。尚恩生物（SUNNCELL）有 bEnd.3 现货（货号 SNL-158），配的是验证过效果的专用培养基和血清，细胞都过 STR 鉴定，售后有技术支持，能少走弯路。