细胞背景与来源
COV434 是卵巢肿瘤研究里的一株细胞,但它贴壁慢、贴壁又弱,运输震荡或操作不当就容易大片脱落,是那种“看着简单、实则要细心”的株。
COV434 是从实体原发肿瘤建立的,最初被当作卵巢颗粒细胞瘤,但后来更倾向于卵巢小细胞癌(高钙血症型)。常用于卵巢肿瘤、颗粒细胞相关内分泌研究。
来源:人,卵巢肿瘤。贴壁生长,有两种形态——上皮样细胞和圆形细胞,圆形细胞贴壁较弱、容易漂浮。
应用场景与研究价值
- 肿瘤学:卵巢癌、卵巢小细胞癌的发生与耐药研究。
- 内分泌:颗粒细胞/卵巢内分泌功能研究。
培养特性与注意事项
- 培养基:DMEM + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁慢、贴壁弱,复苏 24 h 内别急着换液,等 48 h 铺展成铺路石状再操作。
- 传代:PBS 润洗后胰酶消化,注意控制时间,用黏附性好的培养器皿;900 rpm 离心 3-5 min。换液 2-3 天一次。
- 冻存:程序性冻存液,程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏:37℃ 水浴至米粒冰块,150g 离心 1-2 min。生物安全:BSL-1,人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。
- 注意:圆形细胞贴壁弱,传代时可收集漂浮的圆形透亮细胞一起传;出现大片脱落要收集细胞重新消化吹散接种。
COV434 贴壁弱,器皿和体系用对很关键。需配套专用培养基,细胞过 STR 鉴定,另外完善的技术支持可以帮判断脱落该怎么处理。