在生物医学研究中，基因修饰小鼠是探索基因功能、模拟人类疾病、评估药物疗效的核心实验模型。而荧光素酶报告基因系统作为非侵入性活体成像技术的关键工具，能够帮助研究者实时、动态地追踪小鼠体内的细胞行为、基因表达和病理进程。然而，面对种类繁多、特性各异的荧光素酶，究竟该如何选择？本文聚焦Firefly luciferase（FLuc）、AkaLuc、NanoLuc（NLuc）、Gaussia luciferase（GLuc）及RLuc（Renilla luciferase）五大主流类型，深度解析其技术特点与选型策略。

荧光素酶的核心参数对比
在展开论述之前，我们首先需要了解各类荧光素酶的基本特性。根据多项研究文献的综合数据，以下是五种常用荧光素酶的关键参数对比：

图1. 萤火虫荧光素酶催化的生物发光反应^[1]

R26-CAG-Luc-2A-EGFP（NM-KI-00087）
 

图2. 活体成像检测R26-CAG-Luc-EGFP KI小鼠的Luciferase表达情况

2 AkaLuc — 深层组织成像的“透视眼”
Akaluciferase是近年来开发的新一代荧光素酶，通过将FLuc与D-萤光素工程化改造而来，实现了发射波长的红移。
 

图3. Akaluc生物发光成像技术在胶质瘤体内扩张追踪中具有更高的灵敏度^[2]

Cd8a-IRES-Luc-2A-EGFP（NM-KI-18030）
 

图4. 在没有任何刺激的状态下，活体成像系统检测出Cd8a-IRES-Luc-2A-EGFP小鼠相比野生型小鼠，会呈现明显荧光

3 NanoLuc^® (NLuc) — 新一代发光明星
NanoLuc是近年来发展最迅猛的荧光素酶类型，由深海虾Oplophorus gracilirostris重组改造而来，代表了新一代报告基因技术的最高水平。
 

图5. NLuc与GLuc在乳腺癌影像学中的比较^[3]

4 Gaussia Luciferase (GLuc) — 分泌型报告基因
Gaussia荧光素酶来源于海葵Gaussia princeps，是一种天然的分泌型荧光素酶。
 

图6. 皮下肿瘤模型血糖监测^[4]

5 Renilla Luciferase (RLuc) — 双报告系统的内参
海肾荧光素酶来源于海洋生物海肾（Renilla reniformis），是经典的二重报告基因系统中的对照基因。
 

实用的"选酶指南"
1. 若您需要超高灵敏度的活体成像
推荐：NanoLuc (NLuc)
100倍于FLuc的信号强度
可检测低至5000个细胞
适合肿瘤微转移、早期感染等研究

2. 若您需要双报告基因系统
推荐：FLuc + RLuc
FLuc作为实验报告基因
RLuc作为内参基因进行标准化
技术成熟，体系完善

3. 若您需要分泌型检测，避免细胞裂解
推荐：NanoLuc (secNLuc) 或 Gaussia (GLuc)
secNLuc：灵敏度更高，但底物需Furimazine
GLuc：技术成熟，可直接从上清检测

4. 若您需要深层组织穿透
推荐：AkaLuc
红移发射(650-677 nm)
组织穿透能力最强
适合颅内、肺部等深层组织成像

5. 若您是首次使用，追求稳妥
推荐：Firefly Luciferase (FLuc)
技术最成熟
试剂易得
文献支持最多

选型避坑指南
荧光素酶技术的快速发展为基因修饰小鼠研究提供了强大的工具。从传统经典的FLuc和RLuc，到高灵敏度的NanoLuc和GLuc，再到红移优势的AkaLuc，不同荧光素酶各有千秋。选择荧光素酶时，建议综合考虑以下因素：

• 检测灵敏度需求：是否需要检测极低丰度信号
• 实验目的：活体成像、组织定位、动态监测
• 预算限制：底物和试剂的成本
• 技术成熟度：新类型可能需要更多优化
• 后期拓展：是否与双报告系统、NanoBRET等技术兼容

基因修饰小鼠的荧光素酶选型，本质是实验需求与酶特性的精准匹配。NLuc的高灵敏度、AkaLuc的深层穿透、FLuc的稳定经济、RLuc的校正价值及GLuc的分泌优势，共同构建了多元化的技术矩阵。研究者需综合考量实验目的、组织特性、检测周期与成本，必要时通过多体系联用，充分发挥各荧光素酶的优势，为生命科学研究提供精准、高效的成像解决方案。

更多相关小鼠模型定制及咨询服务请咨询南模生物技术支持，咨询热线：400-728-0660 (订购/技术热线)

相关阅读
线粒体荧光探针三剑客：Mito-EGFP、mito-QC与MitoTimer，你选对了吗？
化学遗传操控小鼠：DREADDs与CNO的完美组合
光转化蛋白KikGR：轻松捕捉细胞”行踪”

参考文献：
[1] Tsagmo JMN, Rotureau B, Calvo Alvarez E. Animal models of neglected parasitic diseases: In vivo multimodal imaging of experimental trypanosomatid infections. Methods Cell Biol. 2024;188:205-236. doi: 10.1016/bs.mcb.2024.04.003. Epub 2024 May 24. PMID: 38880525.
[2] Bozec D, Sattiraju A, Bouras A, Jesu Raj JG, Rivera D, Huang Y, Junqueira Alves C, Tejero R, Tsankova NM, Zou H, Hadjipanayis C, Friedel RH. Akaluc bioluminescence offers superior sensitivity to track in vivo glioma expansion. Neurooncol Adv. 2020 Oct 10;2(1):vdaa134. doi: 10.1093/noajnl/vdaa134. PMID: 33241215; PMCID: PMC7680182.
[3] England CG, Ehlerding EB, Cai W. NanoLuc: A Small Luciferase Is Brightening Up the Field of Bioluminescence. Bioconjug Chem. 2016 May 18;27(5):1175-1187. doi: 10.1021/acs.bioconjchem.6b00112. Epub 2016 Apr 19. PMID: 27045664; PMCID: PMC4871753.
[4] Wurdinger T, Badr C, Pike L, de Kleine R, Weissleder R, Breakefield XO, Tannous BA. A secreted luciferase for ex vivo monitoring of in vivo processes. Nat Methods. 2008 Feb;5(2):171-3. doi: 10.1038/nmeth.1177. Epub 2008 Jan 20. PMID: 18204457; PMCID: PMC2699561.

关于我们
上海南方模式生物科技股份有限公司（Shanghai Model Organisms Center, Inc.，简称"南模生物"），成立于2000年9月，是一家上交所科创板上市高科技生物公司（股票代码：688265），始终以编辑基因、解码生命为己任，专注于模式生物领域，打造了以基因修饰动物模型研发为核心，涵盖多物种模型构建、饲养繁育、表型分析、药物临床前评价等多个技术平台，致力于为全球高校、科研院所、制药企业等客户提供全方位、一体化的基因修饰动物模型产品解决方案。

南模生物SMOC
南模生物是一家专注于模式生物领域的高新技术企业，致力于为客户提供丰富的模型资源和全方位模式生物服务，涵盖高品质的成品动物模型和专业的个性化模型定制、饲养繁育、表型分析、药物临床前评价等服务。

公众号
微信公众号「南模生物SMOC」在线咨询
拨打400-728-0660
发送邮件至marketing@modelorg.com
点击文末「阅读原文」