肿瘤免疫是肿瘤发生发展过程中机体免疫系统与肿瘤细胞相互博弈的复杂生物学过程。肿瘤细胞通过多重机制构建免疫抑制微环境，实现免疫逃逸，促进肿瘤增殖、侵袭与转移。随着免疫检查点抑制剂、CAR‑T 细胞治疗等免疫疗法快速发展，肿瘤免疫微环境的解析、免疫生物标志物的筛选与定量检测，已经成为肿瘤基础研究、药物研发、临床疗效预判的核心环节。

肿瘤微环境中各类免疫细胞、肿瘤细胞、基质细胞会大量分泌细胞因子、趋化因子、免疫检查点分子，形成复杂的信号调控网络。这些免疫因子可反映机体抗肿瘤免疫激活水平、免疫逃逸程度、炎症浸润状态，是评估肿瘤进展、免疫治疗响应、耐药机制的关键生物标志物。不同因子之间相互调控，单因子检测容易造成信息片面，多指标联合检测能够更加全面还原肿瘤免疫微环境真实状态。

 

（1）Western Blot 蛋白免疫印迹 多用于肿瘤组织样本，检测蛋白表达水平。

• 优势：实验室普及，可检测蛋白表达、蛋白修饰，适合少数关键蛋白后期验证。
• 局限：通量极低，一次只能检测少数蛋白；对体液样本当中低丰度细胞因子灵敏度不足；很难实现多因子谱的系统分析，不适合大样本筛选。

（2）ELISA 酶联免疫吸附实验 经典单因子定量手段，血清、细胞上清、组织匀浆均可使用。

• 优势：操作简单，单靶点定量结果稳定。
• 局限：单块实验仅检测一个指标，如果需要检测十几种免疫因子，会消耗大量样本、时间与试剂，不适合多标志物联合筛选。

 （3）Luminex 液相悬浮芯片技术 肿瘤免疫多因子检测最常用技术，基于荧光编码微球，微量样本同时检测几十种蛋白。

• 优势：样本消耗量低，一份样本同时检测炎症因子、细胞因子、免疫检查点等多个靶点；适配动物模型、临床样本，适合大批量样本开展免疫因子谱筛选，挖掘免疫激活、免疫抑制相关特征标志物。乐备实拥有成熟的人、小鼠、大鼠炎症、免疫肿瘤检查点商业化 Luminex Panel。
• 局限：靶标固定，仅检测预设蛋白，不适合完全无偏向的全新标志物挖掘。

 （4）抗体芯片技术 高通量固相抗体芯片，实现几十至上百个蛋白同步检测。

• 优势：高通量，适合样本初筛，一次性获得大量免疫因子表达谱，快速筛选差异因子。
• 局限：芯片筛选得到的差异蛋白，后续建议使用 Luminex、MSD 开展大样本验证。

 （5）MSD 电化学发光技术 高灵敏度电化学发光检测平台。

• 优势：灵敏度高，动态范围宽，适合低丰度免疫检查点、细胞因子精准定量，对血清、血浆、组织匀浆样本兼容性好，适合免疫治疗药效评价、标志物验证。
• 局限：单块板可检测靶点数量有限，偏向验证阶段，不适合大规模初筛。

 （6）流式细胞术 单细胞水平蛋白检测技术，对细胞悬液样本进行检测。

• 优势：可以在单细胞层面同时检测细胞表面、胞内多重标志物，精准分群免疫细胞亚群，统计 CD4+T、CD8+T、Treg、NK 细胞等各类免疫细胞占比，解析肿瘤浸润免疫细胞组成。
• 局限：只能检测完整活细胞，无法直接检测血清、组织匀浆等体液样本中的分泌型细胞因子。

 （7）DSP 空间多组学技术 组织切片水平空间蛋白检测。

• 优势：保留组织空间位置信息，可以看到免疫因子、免疫细胞标志物在肿瘤组织、癌旁组织的原位分布，解析肿瘤微环境空间格局，区分肿瘤区域、基质区域免疫分子表达差异。
• 局限：偏向组织原位机制研究，不适合大批量体液样本的批量定量。

平台除现成标准化 Panel 外，也支持定制化方案，可按需组合细胞因子、趋化因子、免疫检查点、免疫细胞标志物，适配肿瘤造模、免疫药物药效评价、肿瘤微环境机制等各类课题需求。

原文点击：肿瘤免疫研究：免疫因子生物标志物及多平台定量检测技术解析