猪ANG-2双抗夹心法检测的标准品梯度设置规范操作方法
2026-09-09 来源:本站 点击次数:22
猪ANG-2双抗夹心法检测的标准品梯度设置，可按以下规范操作，保障后续标准曲线R²≥0.99：
📏 梯度浓度范围设置
基于猪ANG-2常规试剂盒的0.75ng/mL~24ng/mL检测范围，设置6个梯度浓度：24ng/mL、12ng/mL、6ng/mL、3ng/mL、1.5ng/mL、0.75ng/mL，覆盖从最高浓度到最低检测限的完整线性区间。
🧪 梯度配制操作
基础准备：将冻干猪ANG-2标准品用试剂盒配套的标准品稀释液充分复溶，涡旋混匀10~15分钟，室温平衡30分钟，避免未溶颗粒导致浓度不均。
倍比稀释：从最高浓度24ng/mL母液开始，每次取等体积母液加入等体积标准品稀释液中，充分混匀后得到下一个梯度，依次向下稀释得到全部6个浓度。
防污染要求：每一步稀释都更换全新的离心管和吸头，避免交叉污染，保证每个梯度浓度精准无偏差。
基质匹配优化：优先使用与待测样本基质一致的稀释液（如含1%BSA的空白猪血清）配制标准品，最大程度降低基质效应带来的结合偏差。
📌 配套孔位设置
取出96孔板，把6个标准品梯度分别设置2个复孔，同时单独设置空白孔不加标准品，后续加样时按浓度从低到高的顺序依次加入100μL对应标准品溶液，即可开展后续孵育操作。
📏 梯度浓度范围设置
基于猪ANG-2常规试剂盒的0.75ng/mL~24ng/mL检测范围，设置6个梯度浓度：24ng/mL、12ng/mL、6ng/mL、3ng/mL、1.5ng/mL、0.75ng/mL，覆盖从最高浓度到最低检测限的完整线性区间。
🧪 梯度配制操作
基础准备：将冻干猪ANG-2标准品用试剂盒配套的标准品稀释液充分复溶，涡旋混匀10~15分钟，室温平衡30分钟，避免未溶颗粒导致浓度不均。
倍比稀释：从最高浓度24ng/mL母液开始，每次取等体积母液加入等体积标准品稀释液中，充分混匀后得到下一个梯度，依次向下稀释得到全部6个浓度。
防污染要求：每一步稀释都更换全新的离心管和吸头，避免交叉污染，保证每个梯度浓度精准无偏差。
基质匹配优化：优先使用与待测样本基质一致的稀释液（如含1%BSA的空白猪血清）配制标准品，最大程度降低基质效应带来的结合偏差。
📌 配套孔位设置
取出96孔板，把6个标准品梯度分别设置2个复孔，同时单独设置空白孔不加标准品，后续加样时按浓度从低到高的顺序依次加入100μL对应标准品溶液，即可开展后续孵育操作。
相关文章
更多 >