OX40是放大T细胞抗肿瘤免疫的重要共刺激受体。激动型OX40抗体有两重作用：一方面增强效应T细胞的增殖与功能，另一方面经Fcγ受体介导的抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC）清除瘤内调节性T细胞（regulatory T cell, Treg）。临床在研的OX40激动剂大多是高亲和力抗体，然而亲和力与激动活性之间的关系一直不清楚。

2026年3月30日，南开大学、天津医科大学联合上海科技大学团队，在Journal for ImmunoTherapy of Cancer在线发表题为"HFB301001, an OX40-based immunotherapy, drives Treg clearance and CTL activation through optimized OX40 receptor clustering"的研究论文。此研究表明，降低而非提高亲和力，可以让OX40激动抗体引起更强的受体聚集、更充分的T细胞活化与更有效的Treg清除。

南模生物为该研究提供了hOX40（目录号：NM-HU-00041）及Fcgr3-KO（目录号：NM-KO-190189）小鼠模型。

低亲和力的HFB301001引起更强的受体聚集
研究团队通过高通量功能筛选获得OX40激动抗体HFB301001，其活性依赖Fc介导的交联。结构预测与氢氘交换质谱一致提示，HFB301001的表位主要位于OX40的CRD1区域，不与OX40L的结合界面重叠；功能实验也显示它不干扰OX40L介导的信号，而OX40L竞争型抗体BMS 986178则剂量依赖性地抑制该信号。

随后，研究团队对HFB301001重链与轻链CDR3区域的两个氨基酸位点做随机突变，经噬菌体展示筛选得到亲和力更高的变体。原始HFB301001亲和力最低（KD约2.86×10⁻⁷ M），高亲和力变体HFB301001hi约为7.73×10⁻⁹ M。令人意外的是，亲和力更低的HFB301001在报告细胞中引起更强的活化，在高、低两个剂量下都引起更强的OX40聚集；在肺癌患者淋巴结来源的T细胞中，它也带来更高比例的CD25+CD69+、IFN-γ+与GZMB+ CD3+ T细胞。ADCC方面，HFB301001对FcγRIIIa报告细胞的活化更强，与人NK细胞共培养时对hOX40小鼠来源Treg的杀伤也更强。

疗效依赖Fc功能与ADCC对瘤内Treg的清除
研究团队构建了不同Fc性质的HFB301001同种型。其中mIgG2a的抑瘤作用最明显，丧失FcγR结合的DANA突变体基本无活性，mIgG1与SELF变体居中。在Fcgr3-KO小鼠接受hOX40小鼠来源Treg过继的模型中，抗体只作用于过继来的Treg：HFB301001在野生型小鼠中抑制肿瘤生长，在Fcgr3-KO小鼠中作用减弱；HFB301001hi在两组小鼠中均未见抑瘤。

食蟹猴安全性与患者样本中的验证
食蟹猴单次静脉输注1、10或100 mg/kg并监测15天，暴露量随剂量成比例增加，各剂量均耐受良好，红细胞与血小板相关参数未见治疗相关改变，各剂量组总白细胞计数在观察期内有所下降但淋巴细胞比例未变；需要说明的是，各剂量组外周Treg并未明显减少，作者将其与外周Treg的OX40表达较低相联系。在六例非小细胞肺癌患者样本中，肿瘤组织内Treg的OX40表达高于外周血，而CD8+ T细胞的OX40表达较低；以HFB301001联合OKT3处理引流淋巴结细胞与肿瘤切片后，T细胞活化增强，肿瘤组织中Treg数量减少。

综上所述，此研究勾勒出一条降低亲和力、增强受体聚集、放大T细胞活化并经ADCC清除瘤内Treg的路径，为激动型抗体的设计提供了新的可选思路。作者提到，HFB301001已在晚期实体瘤患者中开展I期临床研究；同时，安全性仅观察了15天，未评估停药后的反弹效应。
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