小鼠T细胞无柱分选方案
2026-10-14 来源:本站 点击次数:13斯达特Mouse T Cell Isolation Kit：小鼠T细胞无柱分选方案
简述
小鼠脾脏T细胞分选，卡点常常不在抗体，而在过柱那一步：细胞被挤压、滞留在柱上，活率掉下来，后面做增殖和杀伤实验就开始失真。斯达特（Starter）的 Mouse T Cell Isolation Kit (Column-Free) 换了个思路，用纳米磁珠加环形磁铁做无柱去除分选，全程不碰分离柱。
说白了，就是让T细胞少受那份罪。这篇把原理、操作步骤、实测纯度和配套清单一次讲清。
小鼠脾脏T细胞分选，卡点常常不在抗体，而在过柱那一步：细胞被挤压、滞留在柱上，活率掉下来，后面做增殖和杀伤实验就开始失真。斯达特（Starter）的 Mouse T Cell Isolation Kit (Column-Free) 换了个思路，用纳米磁珠加环形磁铁做无柱去除分选，全程不碰分离柱。
说白了，就是让T细胞少受那份罪。这篇把原理、操作步骤、实测纯度和配套清单一次讲清。
一、无柱分选到底解决了什么麻烦？
在免疫学研究中，获取高纯度、高活性的T细胞是众多下游功能实验（如T细胞增殖、杀伤实验、单细胞测序等）成功的基石。传统磁珠分选技术虽应用广泛，但过柱操作带来的细胞机械损伤、耗时流程以及对特殊设备的依赖，一直是科研人员亟待解决的痛点。
斯达特（STARTER）正式发布 Mouse T Cell Isolation Kit (Column-Free)（货号：S0K3006），用的是无柱去除分选策略，靠纳米级超顺磁珠和高效环形磁铁完成分离。
二、实验思路：负选（去除分选）怎么走？
本试剂盒针对小鼠脾脏单细胞悬液，采用“负选（去除分选）”逻辑，通过生物素标记的抗体鸡尾酒（非T细胞）结合链霉亲和素磁珠，在无需分离柱的情况下，利用环形磁铁高效去除杂细胞，从而获得“untouched”的天然T细胞。
实验分四步：
1. 样本制备：小鼠脾脏研磨 + 红细胞裂解液（货号：abs9101）处理，获得单细胞悬液。
2. 抗体标记：加入T细胞阴选抗体鸡尾酒，标记非T细胞（B细胞、NK细胞、髓系细胞等）。
3. 磁珠结合：加入超顺磁性纳米磁珠，结合已被标记的非目标细胞。
4. 无柱磁分离：将样本管置于 Starter EasyIso Separator（货号：S0D3022）环形磁铁中，静置数分钟。磁珠标记的杂细胞被吸附于管壁，轻轻吸取上清，即得高纯度T细胞。
全程不用色谱柱，也没有剪切力损伤，操作时间也短。
| 样本来源 | C57 Mouse |
| 取材 | Spleen |
| 样本处理 |
通过研磨加裂红方式处理为单细胞悬液 |
| 分选目的细胞 |
T细胞 分选策略（去除分选without column） |
三、磁珠和磁铁，凭什么做到温和？
1. 磁珠小，对细胞更友好
斯达特磁珠直径仅 50nm，在同类磁珠里属于偏小的一档。其右旋糖酐包覆铁核结构不仅可生物降解，对细胞无毒性，也不影响分选后细胞的尺寸、颗粒度与活化状态。流式验证下来，分选后的T细胞可以直接接增殖、分化或杀伤实验。
2. 不用分离柱，就没有机械损伤
传统过柱分选易造成细胞物理挤压和滞留损失。本试剂盒采用 环形磁铁 + 无柱体系，在温和的磁场下完成分离，尽量保住细胞活率和得率，对珍稀样本或对活性要求高的下游实验更友好。
3. 纯度看实测数据
虽为无柱设计，但得益于高效抗体的特异性结合与纳米磁珠的均匀分散性，本试剂盒在小鼠脾脏样本中可稳定获得高纯度T细胞。预实验数据里，分选后 CD3+ T 细胞纯度不低于传统过柱法。
四、分选效果：实测数据怎么说？
为验证分选效果，我们使用C57小鼠脾脏单细胞悬液进行测试，并通过流式细胞术（APC-Cy7 anti-Mouse CD3 Antibody，货号：abs1850064）进行纯度鉴定。
分选前，未分选的脾细胞
流式图中CD3+ T细胞占比约为 35%-45%（受个体差异影响）。
图示：斯达特Mouse T Cell （图片来源：斯达特官网技术软文）
分选后，走一遍无柱去除分选
经过斯达特无柱试剂盒处理后，CD3+ T细胞纯度跃升至 92% - 96%。同时，细胞回收率稳定在80%以上，且台盼蓝染色显示细胞活率＞95%。
图示：斯达特Mouse T Cell （图片来源：斯达特官网技术软文）
五、配套试剂一览
斯达特不只提供核心的分选磁珠，还配齐了实验要用的辅助试剂与耗材：
| 产品分类 | 产品编号 | 名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| T细胞无柱阴选磁珠 | S0K3006 | Mouse T Cell Isolation Kit (Column-Free) | 100T |
| T细胞阴选试剂盒 | 其他品牌 | Mouse T Cell Isolation Kit | For processing 1 x 10⁹ cells |
| 环形磁铁 | S0D3022 | Starter EasyIso Separator | 盒 |
| 分选Buffer | S0D3018 | Starter MagSep Separation Buffer | 250ml |
| 筛网 | abs7231 | 40um细胞筛网（300目，蓝色，底面过滤） | 50个/箱 |
| 红细胞裂解液（1×） | abs9101 | RBC Lysis Buffer | 100ml |
| 阻断FCR非特异性染色 | S0B0599 | Mouse FcR Blocking Reagent | 200T |
| 染色缓冲液 | abs9475 | Flow cytometry staining buffer | 500ml |
| 流式鉴定 | abs1850064 | APC-Cy7 Rat anti-Mouse CD3 Antibody(17A2) | 100T |
六、这套方案适合哪些实验场景？
• 小鼠免疫细胞功能研究（如T细胞体外激活、增殖抑制实验）
• CAR-T/TCR-T等细胞治疗早期工艺探索（需高活性初始T细胞）
• 单细胞测序（scRNA-seq）前样本制备（要求无偏倚、高活性）
• 肿瘤微环境免疫细胞亚群分析
结语：要不要换成无柱方案？
斯达特在这套试剂盒上押的是“温和”两个字：纳米磁珠可生物降解，不改变分选后细胞的尺寸、颗粒度和活化状态，拿到细胞就能直接接增殖、分化或杀伤实验。货号 S0K3006，规格 100 T，储存条件 2-8°C，别冷冻。
换不换，其实取决于你的样本量和下游实验对活性的要求。你现在的分选流程，回收率和活率各是多少？
换不换，其实取决于你的样本量和下游实验对活性的要求。你现在的分选流程，回收率和活率各是多少？
本文由斯达特技术专家团审核发布
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