细胞分选柱：如何用磁性分离拿到高纯度目的细胞？

简述
细胞分选的目的就一句话：拿到干净的目的细胞。

柱子在里面干的事不复杂，铁磁基质被磁化后形成局部高梯度磁场，带磁珠的细胞被吸住，没带的流走。麻烦的是细节：上样量、润洗、洗脱体积，每一步都能把回收率拉下来。

一、细胞分选为何是细胞功能研究的先决条件？

细胞学研究中一个很重要的课题就是细胞的分离纯化，尤其是需要对某种特定的细胞进行功能研究时。例如，对细胞培养上清液通过ELISA分析检测细胞因子、细胞共培养检测细胞功能等，都需要得到高纯度的目的细胞。因此，高效地分离所需要的目的细胞是进行细胞功能研究的先决条件。

细胞分选是指根据细胞所具有的特性把某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术，它是对某一特定细胞进行生化分析和功能分析的前提和基础。分选后细胞的纯度、活性和功能完整性，直接决定了后续实验数据的可靠性。例如，在免疫细胞功能研究中，若分选后的T细胞中混有较高比例的B细胞或单核细胞，共培养实验中的细胞因子分泌谱将无法准确归因于T细胞。

图示：原文配图（来源：斯达特官网技术软文）

二、常用的细胞分选方法有哪些？

常用的细胞分选方法主要有两大类：一类是基于细胞物理性质的密度梯度离心法，另一类是基于免疫识别特性的方法。

密度梯度离心法依据细胞在密度梯度介质中的沉降速率差异进行分离，操作相对简单，但分辨率有限，难以区分密度相近的细胞亚群，且对细胞活性可能产生一定影响。

基于免疫识别特性的方法则利用细胞表面特异性抗原与相应抗体的结合来实现分离，分辨率显著提高。主要包括两种主流技术：荧光激活细胞分选法，通过荧光标记抗体结合流式细胞术实现单细胞级别的高精度分选，可同时区分多个参数，但设备要求高、分选速度相对较慢、对细胞活性有一定影响；磁性激活细胞分选法，通过偶联抗体的磁珠标记目标细胞，在磁场中实现分离，操作快速、温和，适合大量细胞的快速富集和功能研究。

实际研究里两种方法常配合着用：先用磁学分选做初步富集，再用流式分选精纯。通量和纯度各拿一半。

三、细胞分选柱的核心作用：如何构建高梯度磁场实现细胞滞留？

磁性激活细胞分选法的核心分离过程，依赖于细胞分选柱这一关键组件。分选柱内填充有铁磁性基质（通常为钢珠或铁磁纤维），当分选柱置于外部磁力架中时，铁磁性基质被磁化，在柱内形成远高于外部磁场的局部高梯度磁场。

当细胞悬液通过分选柱时，偶联磁珠的细胞在磁场作用下被吸附并滞留在柱内基质表面；而未标记磁珠的细胞由于没有磁性，顺利通过分选柱流出。随后，将分选柱从磁分选器中移出，磁场消失，柱内滞留的标记细胞即可被缓冲液洗脱回收。

分选柱的这一设计使其能够在较低的外部磁场强度下实现高效细胞滞留，同时保持温和的分离条件，减少对细胞活性的损伤。分选柱的规格（如柱体积和基质填充量）需与样本中目标细胞的数量和磁珠标记效率相匹配，细胞上样量过大可能堵塞柱子，降低分选效率；分选柱规格不合适则可能影响纯度和回收率。

四、细胞分选柱的应用场景与操作要点

细胞分选柱广泛应用于免疫细胞分离、肿瘤浸润淋巴细胞获取、干细胞富集及稀有细胞分选等场景。根据分选策略的不同，分选柱可用于阳性分选（磁珠标记的细胞为目的细胞，滞留在柱内后被洗脱回收）或阴性分选（磁珠标记的细胞为非目的细胞，目的细胞先行流出）。

在操作中，需注意以下要点：分选前应制备高质量的单细胞悬液，去除细胞团块和碎片，以防堵塞柱子；分选柱使用前需用缓冲液润洗，以平衡柱内环境；上样时应控制细胞浓度和体积，避免过载；洗脱时需使用足够体积的缓冲液，确保标记细胞被充分回收。

斯达特分选柱、磁力架与磁珠

表里 5 件都是分选环节的东西，没有一支直标抗体。

正文重点讲的 MultiStand 是 S0D3005，1pc，￥1,350，可同时容纳多根柱子平行跑。柱子有两型：S0D3012（S 型，25 支装，￥1,710）、S0D3011（L 型，25 支装，￥2,520，货期栏空着）。

磁珠只有 Streptavidin Nanobeads（S0K0008），0.5ml / 1mL，￥1,100，走生物素化间接标记；另有 Dead Cell Removal Set（S0K0009），1mL，￥3,000。

阳性分选常用的 CD3/CD4 直标磁珠、NK 细胞分离套装，表里都没有。具体规格与价格以官网产品页为准：

数据来源：斯达特（Starter）官网产品页 S0K0008、S0K0009、S0D3012、S0D3005、S0D3011，信息检索时间2026-10-30

结语：回收率差一点，结论就差很多

分选柱的价值不在参数表上，在可重复性。同一批样本、同一根柱子，两次回收率差 20%，后面的功能实验就没法比。

你的回收率是怎么算的？只数活细胞，还是把流式纯度也算进去？

本文由斯达特技术专家团审核发布

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原文出处：细胞分选柱：如何用磁性分离拿到高纯度目的细胞？