产品描述
限制性内切酶Dpn I可有效识别并切断腺嘌呤甲基化的GmATC,而不能切断非甲基化的GATC序列。从(dam+)菌株中提取的质粒因已经被甲基化,可作为Dpn I的底物。该产品可广泛应用于分子克隆、基因分型、DNA印迹、RFLP技术、SNP等多项技术领域。
酶切位点
5, GAm6↓TC 3,
3, CT↑Am6G 5,
产品组分
组分编号 |
组分名称 |
规格 (11001ES76,500 U) |
11001-A |
Dpn I (10 U/μL) |
50 μL |
11001-B |
10×Buffer Tango (With BSA) |
1 mL |
活性定义
在50 μL反应体系中,37 ºC,1 h完全消化1 μg甲基化pBR322 DNA的酶量定义为1个酶活性单位(U)。
运输与保存方法
冰袋运输。-20保存。
使用方法
1. 配制反应体系(20 μL)
组分 |
加入量 |
终浓度 |
10×Buffer Tango (With BSA) |
2 μL |
1× |
Dpn I |
0.5-2 μL |
0.25-1 U/μL |
DNA(0.5-1 μg/μL) |
1 μL |
25-50 ng/μL |
Nuclease-free water |
Up to 20 μL |
- |
2. 反应程序
1)孵育:37℃,1-16 h。注:具体消化时间根据自己的试验情况确定,勿超过16 h。
2)失活反应:20 min 即可。
注意事项
1)Dpn I适合切开完全甲基化的位点,对于半甲基化的位点作用较弱
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。