第12-19步

徕卡101

取材

从患者到病理学家，准备样本进行诊断需要细心、经验以及合理的流程。

徕卡特地为大家整理了取材、组织处理、包埋、切片以及染色等（常规、特殊、IHC以及FISH）101步操作流程，帮助大家更有效、更简单地获得实验方案，避免错误的发生。

步骤十二

检查固定的状态

🙆 正确：先进行样品固定状态的检查，特别是大样本；

🙅 错误：样品没有检查固定的状态就直接进行脱水。
 

容器中的样本需及时检查固定状态，以确保合适的固定。

步骤十三

制备薄片

🙆 正确：大标本需切成薄片（厚约3-4 mm）且厚度要均一，质地致密的组织尤其重要；

🙅 错误：切片厚度≥6mm，厚度不均一。

图示为肿块脱水切片薄（2-3mm）且均一。此切片能进行有效的脱水并且易于切成蜡片。

步骤十四

避免样本损伤

🙆 正确：仔细处理样本，特别是没有充分固定的组织样本（轻拿、不挤压、使用锋利的刀片）；

🙅 错误：样品没有考虑到固定的状态就随便拿取，有时候还使用钝的刀进行取材。

H&E染色的肺：使用钳子随意夹取组织，引起组织局部有明显的损伤。新鲜的或者固定不充分的组织很容易受损，即使是一些固定充分的组织也会因随意夹取而受损。

步骤十五

避免交叉污染

🙆 正确：每一个样本都放在干净的器皿里，避免样本和样本间的交叉污染；

🙅 错误：不同组织样本在取材的时候，取材板不干净，这会导致不同样本间的交叉污染。尤其是前后进行同一类型标本取材时尤其重要，如果发生携带污染可能会将恶性组织混入良性组织中。

H&E染色肺：含有肝的碎屑，在取材过程中被污染的。

步骤十六

小心使用活检垫

🙆 正确：新鲜或者固定不充分的样本没有包在泡沫活检垫中，特别是空心针活检（避免活检垫的人工损伤）；

🙅 错误：有时候小的、新鲜的或者固定不充分的样本被放在活检垫中，然后装入包埋盒进行固定，这会引起典型的人工“假象”。

新鲜的或者固定不充分的组织在脱水过程中使用泡沫活检垫，活检垫会对组织产生局部压力，导致细胞结构变化，形成可见的三角空间结构。

步骤十七

选择合适的包埋盒

🙆 正确：不同类型的组织样本使用合适的包埋盒进行脱水。组织碎片在脱水过程中容易皱缩，如果包埋盒过大的话，碎片会漏到脱水试剂中，甚至转移到其他样本中；

🙅 错误：“一种大小满足所有”：一个包埋盒放置所有大小的样本。

A. 一些小的组织碎片从包埋盒中漏出，脱水过程（组织会发生皱缩）该现象特别容易发生；
B. 合适大小的包埋盒放置合适大小的组织。

步骤十八

避免包埋盒超载

🙆 正确：从不让包埋盒超载，如果组织太大的话，使用第二个包埋盒；

🙅 错误：组织充满包埋盒，这会阻碍脱水试剂的流通，导致脱水效果差。有时可能导致样本变形。

图中包埋盒都超载了，如果继续进行脱水的话，有可能导致样本变形或者脱水不充分。

步骤十九

准确、清楚地标记包埋盒

🙆 正确：为了更准确地识别样本，包埋盒必须进行清楚的标记；

🙅 错误：有时候很难去辨识包埋盒上的标记，只能猜测其内容。

A. 标记模糊不清的包埋盒均不能使用；

B. 徕卡打号机处理的包埋盒标记清晰可辨。

接下来我们将会为大家带来组织脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等操作流程小贴士，感兴趣的话可以关注我们徕卡101系列，后续我们将会为您奉上更详尽的内容。

*文章来源于徕卡,欲了解更多徕卡产品信息，欢迎关注昊诺斯官方工作号或登录昊诺斯生物官方网站 www.herosbio.com 

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