样品要求:
1. 本试剂仅适用于检测牛血清或血浆。
2. 为取得最佳实验效果,避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品;
3. 短期(3天内)将进行检测的血清样品可存放于2~8℃;如需长期保存,应置于-20℃以下,避免反复冻融。
检测方法:
1. 洗涤液配制:用蒸馏水或去离子水将洗涤液10×(2号液)按1:10稀释(例如,取100mL洗涤液10×,加900mL蒸馏水或去离子水混合),充分混匀即为工作浓度洗涤液。
2. 样品稀释及加样:用样品稀释液(5号液)将待检血清按1:100稀释(如5μL血清+495μL样品稀释液),在样品孔每孔仅加入已稀释的待检样品100μL;如果采用血清稀释板稀释样品,其使用方法详见说明书背面。
3. 加对照品:阴性、阳性对照品不用稀释,直接加样。 阴性对照2孔,每孔仅加入100μL阴性对照品;阳性对照2孔,每孔仅加入100μL阳性对照品。盖好封板膜,37℃避光
反应30分钟。
4. 洗板:甩去孔内液体,每孔注满工作浓度洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟;最后一次甩净,拍干。
5. 加酶反应:每孔加酶标结合物(1号液)50μL,盖好封板膜,37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体,如上洗板,拍干。
6. 显色反应:按所需用量,临用前取等体积底物液(3号液)和显色液(4号液)充分混匀,每孔加100μL,盖好封板膜,37℃避光反应10分钟。
7. 终止反应: 加终止液(6号液)50μL,用酶标仪双波长(450nm作为主波长,630nm作为参比波长)读取OD值。