文章

病毒沉淀剂产品特点与使用方法

2022-06-08     来源:本站     点击次数:382

生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
产品特点:
1、能浓缩病毒100倍以上,适合各种病毒。
2、比超速离心法、密度梯度离心分离法和过滤法更温和,回收率更高,并且大部分病毒能保持活性,适合各种后续实验,包括转染实验和核酸纯化。
3、比超速离心法和密度梯度离心分离法简单,不需要大型离心机等设备。
4、适合水样、细胞培养基上清和其他不含细胞的样品。本产品100mL可以处理400mL含病毒的溶液,可以将病毒浓缩100倍以上。
5、已经成功用于coronaviruses、rhabdoviruses、parainfluenzaviruses、respiratory syncytial virus、rubella virus、picornaviruses等病毒。
6、对环境水样,请不要使用本产品,而是使用水体病毒沉淀剂。
储存条件:
常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂:
PBS缓冲液或TES缓冲液(用于重悬病毒)
使用方法:
注意:需要尽量减少含病毒溶液中蛋白的浓度。收集培养细胞分泌的病毒前,最好换上不含血清蛋白和其他蛋白成分的培养基。
1、将培养细胞刮下,和培养基一起全部转移到干净的离心管中,10000rpm 4℃离心20分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果培养细胞内还毒颗粒,并且病毒颗粒可以抵抗冻融,则可以把细胞冻融数次,释放出包浆的病毒,然后再转移到干净的离心管中,10000rpm 4℃离心20分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果病毒溶液不含细胞成分,则直接进入下一步。

2、在含病毒的上清中加入1/4总体积的本产品(4mL病毒溶液则加1mL本产品),4℃冰箱中放置过夜或12小时以上。病毒在此期间将形成沉淀。

3、10000rpm 4℃离心20分钟收集病毒沉淀,尽可能弃掉所有上清(可以暂时保留上清,等确认病毒浓缩成功后再丢弃)。

4、将离心管放回离心机短暂离心数秒,再次小心去除残留上清。

5、将沉淀(病毒颗粒)溶于适量预冷的自备的缓冲液(如PBS缓冲液、TES缓冲液和培养基中,取决于后续实验),立即使用或者-20℃长期保存。
相关文章 更多 >