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MSC间充质干细胞培养注意事项及实验数据分享

2024-03-11     来源:本站     点击次数:1525

MSC:间充质干细胞,是一群贴壁生长、形态类似于成纤维细胞的多能成体干细胞,存在于脐带、骨髓和脂肪组织等多种组织中,并且可以分化成多种不同的组织。
 

Q:为什么培养的MSC细胞会卷边?
A:细胞的铺瓶密度不均匀,把培养瓶放到培养箱的时候可以按照十字法轻轻晃一下,更均匀。

Q:为什么不同品牌的培养基培养效果不一样?
A:首先,各个品牌的试剂盒使用说明和成分都不同程度有所差异,部分国产品牌的铺瓶密度在1E4-2E4个/cm2,需要大的细胞起始量。

同立海源生物的MSC试剂盒套装建议的铺瓶密度按照不同的传代数,P1-P3代4E3-6E3个/cm2,P3-P5代6E3-8E3个/cm2。建议的铺瓶体积:5mL/T25瓶, 13mL/T75瓶, 30mL/T175瓶。

Q:添加物有絮状物怎么处理?
A:可以离心去除,3000rpm, 5min

Q:关于MSC培养的其它注意事项?
A:添加物不要反复冻融。培养基提前放到室温。

实验数据分享
1、样本:冻存的P1代MSC细胞;
2、实验组:同立海源生物MSC无血清培养基;对照组:国产竞品MSC无血清培养基;
3、传代时间:72h;
4、铺瓶密度:P3代以前,4E3-6E3个/cm2,P3代以后,8E3个/cm2;
5、结论:同立海源生物MSC无血清培养基较竞品有更优异的扩增倍数。P2-P3代同立海源生物的扩增倍数约是竞品的3倍(同立海源生物扩增12倍,竞品扩增4倍)。相同的铺瓶密度等实验条件下,同立海源生物收获的细胞数更多,扩增倍数更高,为客户节约更多成本。
 

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图1 MSC扩增倍数对比
 

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图2 MSC细胞状态
 


临床研究

  • 在肝炎、肝硬化、肝衰竭等肝病的患者中,MSC可以改善免疫调节,可激活不同的信号转导途径调节免疫细胞功能,维持免疫抑制,进而抑制肝脏疾病的发生和发展。

  • 进行疾病治疗研究,MSC治疗激素耐药的急性GVHD已经进入临床试验研究。


干细胞药物
至今有1500+关于MSCs的临床试验在Clinicaltrials.gov上注册,目前全球范围内批准的符合药品定义的MSCs产品约10种,适应症包括移植物抗宿主病等。
 

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AMMS®MSC试剂盒套装2.0适用于原代及冻存间充质干细胞的培养扩增,成分明确,稳定性高,操作简单,无需添加谷氨酰胺,无血清,无异源成分,扩增效率高,表型稳定。该产品已通过美国FDA的DMF备案(035589),干细胞药物临床实验最佳选择。

关于同立海源
北京同立海源生物科技有限公司,专注细胞和基因治疗(CGT)GMP级原料试剂研发及生产,为CGT用户提供产品与服务的整体解决方案。产品涉及细胞分选磁珠试剂、真核/原核重组蛋白、无血清培养基、细胞培养试剂盒等。

公司建有3200m2的研发实验室及GMP级洁净车间,包括细胞分选磁珠开发平台、真核与原核蛋白表达工程平台、无血清培养基开发平台,通过ISO13485和ISO9001双质量体系认证,部分产品已获美国FDA DMF

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