研究发现,利用 GA 可以提高抗坏血酸、可溶性固形物和果实重量的浓度,从而改善番茄果实的坚实度。研究还表明,通过过表达番茄果实组织中的 GA 分解基因 SlGA2ox1 来抑制 GA 的水平,可能会导致早熟,这表明 GA 在番茄的 FR 过程中起着负面作用。而番茄基因组中存在三种GA受体,分别是SlGID1a、SlGID1b1和SlGID1b2,这些受体被认为介导特定的GA反应。尽管已有研究指出某些TFs可能参与了FR中GA的调控,但对于其详细的调控机制,特别是NAC TFs 的调控机制,目前仍缺乏深入的了解。
在这项研究中,作者重点关注了SlNAP1,这是一种正向影响番茄FR的NAC TF。利用CRISPR/Cas9技术,作者发现slnap1突变体在乙烯生成和果实颜色变化方面相较于野生型(WT)表现出延迟现象。通过酵母单杂交(Y1H)和双荧光素酶报告基因(DLR)实验,还证实了SlNAP1能够直接结合到两个关键基因的启动子区域,这两个基因参与GA的降解,即SlGA2ox1和SlGA2ox5,从而激活它们的表达。此外,通过酵母双杂交(Y2H)、双分子荧光互补(BIFC)和荧光素酶(LUC)检测,作者揭示了SlNAP1与SlGID1之间的相互作用。这些发现表明,SlNAP1通过直接激活GA降解基因来正向调控果实成熟。另外,SlNAP1与SlGID1的相互作用可能也在SlNAP1诱导的FR中发挥作用。总体而言,此项研究为 NAC TFs 通过 GA 途径调节番茄 FR 的分子机制提供了重要的见解。