血塞通滴丸为血塞通的新剂型,其主要成分为人参皂苷Rg1,三七皂苷R1。本实验采用高效液相色谱法测定血塞通滴丸中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量。
1、仪器与试药
SSI公司PC-3000高效液相色谱仪,热电300紫外分光光度计,人参皂苷Rg1,三七皂苷R1对照品(中国药品生物制品检定所),血塞通滴丸(批号:20080409,20080401,20080402)本所自制。甲醇为色谱纯,水为纯化水。
2、方法与结果
2.1检测波长确定称取人参皂苷Rg1,三七皂苷R1对照品适量,用甲醇配制成20μg·ml-1的溶液,在200~300nm波长处扫描,结果人参皂苷Rg1,三七皂苷R1均在203nm波长处有最大吸收。
2.2色谱条件色谱柱为岛津KromasilC18(4.6mm×25cm);流动相为甲醇-水(58∶42);流速为1.0ml·min-1,检测波长为203nm;理论板数按人参皂苷Rg1,三七皂苷R1峰计算不低于10000,分离度大于2.0。
2.3含量测定
人参皂苷Rg1:精密称定人参皂苷Rg1对照品约60mg,置50ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取1.0,3.0,5.0,7.0,9.0,10.0ml分别置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。结果表明人参皂苷Rg1在浓度0.116~1.160mg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,其回归方程Y=-99466+3257868X,r=0.9992。
三七皂苷R1:精密称定三七皂苷R1对照品约60mg,置50mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0ml分别置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。结果表明三七皂苷R1在浓度0.232~0.812mg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,其回归方程Y=11772+2495523X,r=0.9987。
3、讨论
血塞通滴丸的辅料为聚乙二醇6000。经测试聚乙二醇6000的甲醇溶液无紫外吸收峰,对样品的测定无干扰。本方法简便、准确,可作为控制血塞通滴丸中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量测定方法。