人工固相合成多肽一般是从序列的C端向N端逐个添加氨基酸。多肽合成是基于PeptideSyn技术平台的Fmoc或Boc法的多肽合成（两种方法的合成步骤是相同的，只是α-氨基保护基的脱除方式不同）。这里以Fmoc保护策略法举例说明。合成由下列几个步骤组成：

①挂树脂：根据订单选用并称取相应量的树脂，投入反应器中溶胀备用。

②去保护：Fmoc保护的柱子和单体必须用20%piperidine去除氨基的保护基团。

③检测：检测是否已经把保护基去除，既是氨基是否已经裸露出来。（我们常用茚三酮作为检测试剂，若结果是阳性，则判定氨基裸露）

④激活和交联：下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反应交联，形成肽键。我们需要注意的是氨基酸的投入量不是随意的。为保证肽链合成的准确性；氨基酸，缩合剂以及碱是有一个比例的。这里提供一个参考比例。（规模（mol）：氨基酸：缩合剂：碱=1:3:3:6）

⑤检测：检测是否已经把所需氨基酸连上。结果是阴性，判定氨基酸已经完全连上。

⑥循环：反复循环②-⑤直到合成完成。

⑦将合成的肽从树脂切割和去保护。（Fmoc策略用TFA（强酸）即可将多肽从树脂上切下。）

固相合成肽链，为减少副反应的发生，选用的部分氨基酸的侧链是用保护基团保护起来。但最终的成品只要肽链，既需要脱除保护基。一般为了方便操作，根据肽链上的不同保护基预先配好切割液。（在这里将我常用的其中一种切割液配比举例说明。E液配比：87.5%TFA+5%茴香硫醚+2.5%纯水+2.5%苯酚+2.5%EDT）

⑧使用冰乙醚离心沉淀（至少要洗三遍）；洗脱、冷冻干燥。得出粗品进行MS检测和HPLC检测。