一、凝胶肿胀或卷曲 这种情况可能是由于转膜液过热导致的。发热对转膜的影响主要是造成胶变形、分子扩散，还有就是由于温度升高，气体在buffer中的溶解度下降而溢出形成气泡，影响转膜效果。所以在转膜装置中增加冷却系统就显得尤为重要。一般可采取以下几种冷却方法： 方法一 在转膜前，将转膜缓冲液提前置于4度冷却，待转膜时加入使用。 方法二 在转膜装置内放入冰盒（冰盒提前存放于-20度或-80度冰箱内），然后将整个装置放在一泡沫盒中，泡沫盒中放上碎冰或冰水混合物。当然，有条件的话，可以将整个装置放在4度冰箱里进行。  二、条带歪斜或漂移 出现这种问题，可能是由于海绵使用时间过长，导致海绵变薄，“三明治”结构变得不再紧凑。要想解决这个问题很简单 ，只要换两块新的海绵或者把两块海绵之间的滤纸数量增加一些，“三明治”结构就可以紧凑如初了! 三、膜上有单个或多个白点，是丽春红染色后的膜，可以很直观地反映转膜的效果。可以看到膜上有多个白点，这些白点其实是膜和胶之间产生的气泡造成的，所以制作“三明治”模型的过程中，要时刻注意避免气泡的产生，每一步都要认真的赶气泡！ 四、转膜不充分 转膜不充分这个问题，导致的原因就可能有多个，我们依次来分析一下： 原因一 膜没有完全均匀湿透。那就要使用无水甲醇浸透膜，浸泡活化的时间稍长一些也没关系。  原因二 靶蛋白分子量较小。这时就要选择小孔径的膜，并且缩短缩短转移时间。 原因三 转移buffer中甲醇浓度过高。甲醇浓度过高会导致蛋白质与SDS分离，从而沉淀在凝胶中，同时会使凝胶收缩或变硬，从而抑制高分子量蛋白的转移。如果是这种情况，则需要降低甲醇浓度或者使用乙醇或异丙醇来代替。  原因四 转移时间不够。对于高分子量蛋白来说，转移时间需要适当延长一些。 结尾 好啦，关于蛋白转印过程中所遇到的问题及解决办法就分析到这里啦，希望大家可以顺利获得漂亮的条带。