伤口愈合迁移实验怎样划出标准笔直的方法和应用
2022-11-27 来源:本站 点击次数:2039伤口愈合和迁移试验的应用
细胞迁移发生在许多重要的生理过程中。例如，受控的细胞迁移允许胚胎发育、组织损伤和伤口愈合。相反，细胞迁移在许多病理情况下失调，例如癌症转移和炎症。毫不奇怪，细胞迁移背后的原理已在许多情况下得到研究。
伤口愈合测定和迁移测定是广泛用于分析不同条件下细胞迁移的方法。他们深入了解以下相关科学主题：
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条件迁移和伤口愈合研究：细胞如何在不同条件下迁移（例如，用特定化合物/增强剂/抑制剂处理后，使用 siRNA 或 CRISPR/Cas9 进行基因沉默后，改变底物刚度后，或改变基质组成后)?
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高通量药物筛选：哪种药物会改变特定细胞类型（例如癌细胞）的迁移率？
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细胞相互作用研究：细胞是保持接触还是单独迁移？细胞在迁移过程中如何相互作用？什么是细胞自主迁移能力？
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2D Invasion Assays：两种不同的细胞类型如何相互作用（例如，肿瘤细胞和成纤维细胞）？
抑制剂或促进剂对伤口愈合影响的实例分析。
与一般伤口愈合和迁移测定相比，定向迁移测定（例如趋化性测定）测量 2D 或 3D 环境中的梯度依赖性细胞运动。
如何进行伤口愈合试验/迁移试验
伤口愈合测定/迁移测定的最具特征的读数是细胞覆盖区域（间隙闭合）随时间的变化。进行伤口愈合和迁移试验是一个简单的过程：
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在细胞单层内创建一个物理间隙。
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通过活细胞成像或在不同时间点拍照来监测细胞迁移到间隙的过程。
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手动或使用自动化软件分析间隙闭合率，这是典型的实验读数。
ibidi Culture-Insert 2 孔| 3 孔| 4孔是硅胶插件，具有明确的无细胞间隙，用于伤口愈合、迁移、2D 侵袭检测和细胞共培养。
尽管伤口愈合试验明显简单，但许多因素会影响实验结果，因此必须加以控制。在以下部分中，您将了解伤口愈合检测的原理和设置。此外，我们将讨论 需要标准化的参数，以实现可重现的、稳健的结果。
使用 ibidi Stage Top 孵育系统的活细胞成像显示了 MCF7 细胞在伤口愈合和迁移试验中的间隙闭合。相衬; 10 倍物镜。
参考文献:J.E.N. Jonkman, et al. An introduction to the wound healing assay using live-cell microscopy. Cell Adh Migr, 2014, 10.4161/cam.36224
W.J. Ashby, A. Zijlstra. Established and novel methods of interrogating two-dimensional cell migration. Integr Biol 2012, 10.1039/c2ib20154b
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