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糖蛋白Fibronectin在细胞培养中的功能及作用

2025-04-28     来源:本站     点击次数:51

引言
Fibronectin是一种高分子量的糖蛋白,存在于多种动物细胞表面和细胞外基质中。它由两个分子量为220 kDa的亚基通过链间二硫键连接而成,整体分子质量约为450 kDa。Fibronectin具有独特的V形结构,这种结构使其能够与多种细胞表面受体结合,从而调节细胞的黏附、迁移、增殖和分化。

Fibronectin在细胞培养中的功能

01 促进细胞黏附与铺展
在细胞培养过程中,细胞需要附着在培养皿或支架材料上才能正常生长和分裂。Fibronectin作为细胞外基质的主要成分之一,通过其Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)序列与细胞表面的整合素受体结合,促进细胞的黏附和铺展。这种黏附作用不仅有助于细胞在培养环境中的稳定生长,还能提高细胞的增殖效率。

在细胞培养初期,为了促进细胞的快速黏附和铺展,研究人员常常在培养皿或支架材料上涂布一层Fibronectin。这种处理可以显著提高细胞的附着效率和铺展面积,为后续的实验操作提供便利。例如,在培养BHK、CHO等细胞系时,以1-5 ug/cm²的量包被Fibronectin可以观察到更显著的细胞黏附和铺展效果。


图1.纤维连接蛋白(FN)纤维状基质环绕着培养中的细胞。按照Brenner等人(2000)的方法,将HT1080细胞在含有0.1μM地塞米松和25μg/ml鼠血浆FN的培养基中培养20小时。然后将细胞固定并用抗FN单克隆抗体(IC3)染色,再用荧光标记的山羊抗小鼠免疫球蛋白G染色。图中显示了围绕着用4',6-二甲基-2-苯基吲哚(DAPI)染色的细胞核(蓝色)的FN纤维(绿色)。

02 调节细胞生长与分化
Fibronectin不仅能够促进细胞的黏附和铺展,还能通过激活特定的信号通路来调节细胞的生长和分化。例如,Fibronectin与整合素受体的结合可以激活FAK、AKT、YAP等信号通路,这些信号通路在调节细胞增殖、分化以及维持细胞生物学特性方面发挥重要作用。因此,在干细胞培养、组织工程等领域,Fibronectin被广泛应用于促进细胞的定向分化和功能实现。

在干细胞培养和组织工程领域,Fibronectin的应用尤为广泛。由于干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,因此需要在特定的培养条件下才能维持其生物学特性和功能。Fibronectin作为细胞外基质的重要成分之一,可以通过激活特定的信号通路来引导干细胞的定向分化和功能实现。例如,在心脏分化过程中,Fibronectin被证明对人多能干细胞(hPSC)的心脏分化至关重要。此外,Fibronectin还可以与其他ECM蛋白质协同作用,共同构建复杂的组织工程支架材料,为细胞提供更为全面的支持和保护。

03 改善细胞培养环境
在细胞培养过程中,细胞外基质蛋白质如Fibronectin的添加可以模拟体内微环境,为细胞提供更为接近生理条件的生长环境。这种环境有助于细胞保持其原有的生物学特性和功能,从而提高细胞培养的成功率和质量。此外,Fibronectin还可以与其他ECM蛋白质如层粘连蛋白(Laminin)等协同作用,共同构建复杂的细胞外基质网络,为细胞提供更为全面的支持和保护。

在药物研发和毒性评估过程中,细胞培养是一个重要的实验手段。Fibronectin作为细胞外基质的主要成分之一,可以模拟体内微环境并影响细胞的生物学行为。因此,在药物筛选和毒性评估过程中加入Fibronectin可以更加准确地反映药物对细胞的影响和毒性作用。这种方法的应用有助于提高药物研发的效率和安全性。

展望
Fibronectin蛋白在细胞培养中发挥着至关重要的作用。它不仅能够促进细胞的黏附和铺展、调节细胞的生长与分化,还能改善细胞培养环境并提高实验结果的准确性和可靠性。随着对Fibronectin研究的不断深入和技术的不断发展,相信其在细胞培养、干细胞培养、组织工程以及药物研发等领域的应用将会更加广泛和深入。

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产品名称   Fibronectin-CH296 Protein, Human            货号          UA040264


Measured by the ability of the immobilized protein to support the adhesion of NIH-3T3 mouse embryonic fibroblast cells. The EC50 for this effect is less than 120ng/ml.


>95% by SDS-PAGE& HPLC


产品信息


参考文献
[1].Singh, Purva; Carraher, Cara; Schwarzbauer, Jean E. (2010). Assembly of Fibronectin Extracellular Matrix. Annual Review of Cell and Developmental Biology, 26(1), 397–419.
[2]. Brenner KA, Corbett SA, Schwarzbauer JE. 2000. Regulation of fibronectin matrix assembly by activated Ras in transformed cells. Oncogene 19:3156–63
[3]. Bae E, Sakai T, Mosher DF. 2004. Assembly of exogenous fibronectin by fibronectin-null cells is dependent on the adhesive substrate. J. Biol. Chem. 279:35749–59
[4]. Baneyx G, Baugh L, Vogel V. 2001. Coexisting conformations of fibronectin in cell culture imaged using fluorescence resonance energy transfer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98:14464–68

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