LEGENDplex多因子检测与HTRF/Alpha高通量技术结合助力创新药研发
2026-04-02 来源:本站 点击次数:27LEGENDplex与HTRF/Alpha双剑合璧，赋能创新药研发细胞因子检测全场景
在创新药研发的全生命周期中——无论是抗体药物、小分子抑制剂还是细胞疗法，细胞因子作为免疫细胞受激后的核心信号分子，其爆发式释放往往标志着药物触发了关键的免疫应答或毒性反应。因此，对细胞因子产生机制的精准解析与信号通路的高效筛选，始终是评估药物有效性与安全性的命脉。而经典ELISA技术受限于耗时久、通量低及高样本消耗等瓶颈，已难以满足药物研发中海量样品与多指标筛选的高效需求。
为提升研发效率，针对“多因子检测”与“高通量药效评价”这两大核心场景，LEGENDplex多因子检测与HTRF/Alpha高通量技术提供了完美的互补方案。下文将结合两大标杆案例进行实战演练，让我们透过这些真实应用，见证LEGENDplex+HTRF/ALPHA如何赋能创新药研发的生命周期。
| 检测技术 | 多因子检测 | 单因子高通量检测 | |
| 产品图片 |  |
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| 特性 | LEGENDplex 流式微球 |
HTRF 均相时间分辨荧光 |
Alpha 放大的发光邻近检测 |
| 核心技术 | 编码微球+流式细胞术 | 镧系元素穴状化合物+时间分辨-荧光共振能量转移 | 供体/受体微球+单线态氧 |
| 检测类型 | 多重检测 (1~14种/孔) |
单重检测 | 单重或双重检测 |
| 检测 指标类型 |
细胞因子（白介素、趋化因子、生长因子、干扰素）、免疫球蛋白、神经标志物、激素 | 细胞因子（白介素、趋化因子、生长因子、干扰素）、免疫球蛋白、第二信使、神经标志物、信号通路蛋白等 | 细胞因子（白介素、趋化因子、生长因子、干扰素）、免疫球蛋白、第二信使、神经标志物、信号通路蛋白等 |
| 样品量 | 12.5ul/25ul | ≤16ul | ≤5ul |
| 检测种属 | Human/Mouse /Rat/NHP |
Human/Mouse /Rat/NHP |
Human/Mouse /Rat/NHP |
| 操作流程 | 需洗涤 | 免洗(均相)，实验操作可控制在2h | 免洗(均相)，实验操作可控制在2h |
| 自动化 程度 |
中等 | 高(适合HTS) | 高(适合HTS) |
| 主要设备 | 流式细胞仪 | 多功能酶标仪 (TRF模块) |
多功能酶标仪 (Alpha模块) |
| 灵敏度 | 高(pg/mL级别) | 高(pg/mL级别) | 高(低至fg/ml级别) |
| 抗干扰性 | 强 | 较强(时间分辨消除背景) | 强(光化学机制) |
多指标同步检测的LEGENDplex，及其在安全性评估的应用
LEGENDplex是基于流式平台的多因子检测方法，通过在不同大小及带有不同强度APC荧光的微球上偶联不同的捕获抗体，实现对特定靶标蛋白的捕获，通过检测抗体和PE通道实现信号检测。
使用LEGEDNplex利用不同大小的微球以及微球上不同荧光强度的APC，巧妙地实现14种不同指标同时检测。同时，对于样品的体积要求大大降低。一份珍贵样品，仅需最低12.5ul，便可进行14种不同指标的同时检测，相比ELISA检测效率提升十倍以上。
多因子检测实战：短期CAR-T疗法安全性评估，精准预警细胞因子风暴
细胞因子风暴/细胞因子释放综合征是CAR-T常见的副作用之一，由免疫系统过度激活引起，多种细胞因子出现异常高表达。轻症表现为高烧乏力恶心或者呕吐，严重时可能出现血压严重下降、呼吸困难甚至器官功能衰竭。为了提高患者的可及性和提高细胞制备效率，短期CAR-T细胞疗法（short termCAR-T，即在载体暴露后仅24小时即进行治疗）成为当前研究的热点。Arezoo等[i]发现，相比于传统制备的CAR-T细胞，stCAR-T细胞展现出更强的细胞因子风暴（figure4C&D）。
同时对多种细胞因子的检测，对于ELISA而言极具挑战性。而多因子检测的LEGENDplex可以从容地同步检测IL-6，IFN-γ，TNF-α，GM-CSF，IL-2，IL-10，MCP-1等多种不同细胞来源的细胞因子，从单份样品中获得更丰富的信息，实现了对细胞因子风暴的高效监测。
免洗高通量的HTRF/Alpha技术，及其在药效评价中的应用
针对炎症性疾病与肿瘤免疫微环境等高频研发场景，HTRF/Alpha细胞因子检测试剂盒凭借五大核心优势，确立了其作为新药研发‘不二之选’的地位。
对于追求极致效率的药企及CDMO/CRO伙伴而言，这不仅是获取数据的工具，更是在最短时间内交付高质量决策依据的‘加速器’。诺华（Novartis）口服TLR7/8抑制剂MHV370的成功推进便是最佳佐证：该技术如何助力其高效完成关键药效评价，并以前所未有的速度推动药物从临床前研究迈向临床II期？
单因子高通量实战：诺华MHV370药效评估，HTRF/Alpha细胞因子护航迈入临床II期
在红斑狼疮研发领域，TLR7/8的异常激活被视为核心致病驱动。诺华[ii]在顶级期刊《Cell Reports Medicine》发表重磅研究，详细揭示了口服TLR7/8小分子抑制剂MHV370的临床前特性。面对海量的化合物筛选及体外药效验证的需求，HTRF及AlphaLISA均相免洗技术可将复杂的实验流程压缩至2小时以内，并兼容96/384/1536孔高通量自动化筛选。凭借快速高通量优势，诺华团队迅速验证了MHV370对TLR7/8通路激活的强效抑制作用，并精准捕捉到下游细胞因子水平的显著变化。数据显示，MHV370在体外强效抑制了由ssRNA驱动的IFN-α（AlphaLISA）、CXCL10（AlphaLISA）、TNF-α（HTRF）、及IL-6（HTRF）等多种细胞因子产生。上述扎实可靠的研究结果为MHV370推进至II期临床试验提供了关键数据支撑。
双剑合璧，共筑新药研发加速引擎
从LEGENDplex以微量样本洞察细胞因子风暴的“全景图谱”，到HTRF/Alpha以均相免洗技术实现药效评价的“极速突围”，这两项技术是创新药研发生命周期中互为补充的“双剑”。前者为安全性评估提供了不可或缺的深度与广度，后者为早期药物发现注入了惊人的速度与效率。
在抗体药、小分子抑制剂及细胞疗法竞相角逐的今天，选择匹配的检测策略，意味着更短的研发周期、更低的试错成本以及更高的成功概率。未来，瑞孚迪（Revvity）将继续深耕细胞因子检测领域，提供更多元化、更精准的应用方案，助力全球药企与科研机构在创新药的竞速场上，以更敏锐的洞察力和更高效的执行力，加速良药问世，造福人类健康。
参考文献
[i] Jamali A, etal. Early induction of cytokine release syndrome by rapidly generated CAR T cells in preclinical models. EMBO Mol Med. 2024 Apr;16(4):784-804. doi: 10.1038/s44321-024-00055-9.
[ii] Hawtin S, etal. Preclinical characterization of the Toll-like receptor 7/8 antagonist MHV370 for lupus therapy. Cell Rep Med. 2023 May 16;4(5):101036. doi: 10.1016/j.xcrm.2023.101036.
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