活细胞动态成像及分析系统在细胞毒性研究中的应用
2025-05-13 来源:本站 点击次数:176在生命科学研究领域，细胞毒性和氧化应激的研究意义重大，应用极为广泛，常用的检测方法包括 MTT 法、CCK8 法等。这些传统的终点检测技术，在反应结束后得到细胞增殖和毒性结果，无法捕获细胞动态变化的全过程，可能出现假阳性数据。另外，需要耗费大量的试剂和时间进行条件优化和筛选，耗时费力，效率不高。来自暨南大学再生医学院教育部重点实验室的研究人员，采用活细胞动态成像及分析系统进行细胞研究实验，更高效的监测细胞状态变化。
在本研究中，作者采用了德国 innoME 公司自主研发和生产的 zenCELL owl 活细胞动态成像及分析系统进行实验。该设备采用非侵入，无标记的实时分析方法，置于培养箱内，通过实时图像技术，实现自动远程监测和分析箱内细胞的生长状态、细胞数量等信息，24 通量的设计，可同时满足监测 24 个样本的高通量需求，相当于在培养箱内装上了 24 个“透视眼”，能随时观察并记录细胞的生长变化过程，是一种高效、快速、经济的研究方式。
研究人员进行了两组实验：
第一组实验将 293T 细胞以5×104个的接种数量接种于 24 孔培养板中，分别用25μM和250μM 的 H2O2 处理，置于培养箱中培养 24 小时后，更换新的培养液。然后采用 zenCELL owl 活细胞动态成像及分析系统监测24 小时，每 30min 采集一次图像，数据通过GraphPad Prism 8统计分析软件进行分析和绘制。
研究人员进行了两组实验：
第一组实验将 293T 细胞以5×104个的接种数量接种于 24 孔培养板中，分别用25μM和250μM 的 H2O2 处理，置于培养箱中培养 24 小时后，更换新的培养液。然后采用 zenCELL owl 活细胞动态成像及分析系统监测24 小时，每 30min 采集一次图像，数据通过GraphPad Prism 8统计分析软件进行分析和绘制。
通过数据分析及图像比较发现，25μM 的 H2O2对 293T 细胞没有明显影响，细胞正常增殖，其增殖活性与对照组相同；但高浓度250μM 的 H2O2就像 “细胞杀手”，作用 6 小时后对细胞造成不可逆的损伤，细胞变圆脱落，细胞汇合度降低。这说明250μM H2O2能够诱导293T细胞死亡，而25μM H2O2对细胞没有明显的细胞毒性作用。活细胞动态成像及分析系统能实时监测 H2O2对 293T 细胞的毒性作用。
第二组实验细胞采用的是心脏微血管内皮细胞（CMECs，Cardiac Microvascular Endothelial Cells）。从3个月大的雄性 SD （Sprague-Dawley）大鼠获取CMECs，以1×104个细胞的接种数量将其接种于 24 孔培养板中，分别用浓度为100nM、250nM、500nM 和 1000nM 的阿霉素（Dox）处理，24 小时后更换新鲜培养基，并用 zenCELL owl 活细胞动态成像及分析系统监测 5 天，每隔 1 小时采集一次图像，所得数据用GraphPad Prism 8统计分析软件进行分析和绘制。
通过数据分析及图像比较发现，经过 Dox 处理 6 小时后，所有实验组细胞都停止分裂，而对照组细胞正常增殖；15 小时后，实验组细胞出现细胞碎片。Dox 浓度越高，CMECs 细胞的密度就越低，当 Dox 浓度达到 250nM 时，细胞密度明显下降。也就是说250 nM及以上剂量的Dox能够诱导CMECs的细胞毒性作用。这也验证了活细胞动态成像及分析系统能有效监测 Dox 对 CMECs 细胞的毒性。
这项研究通过活细胞动态成像及分析系统观察和分析了H2O2在293T细胞中诱导的氧化应激细胞毒性作用和 Dox在CMECs中诱导的细胞毒性作用。研究结果表明，zenCELL owl 活细胞动态成像及分析系统在培养箱内同时原位监测 24 个细胞样本，捕捉的图像和每个视野里的细胞密度匹配度高，可通过对比细胞增殖和密度差异，定量分析细胞毒性。之前也有研究表明，活细胞动态成像及分析系统分析麦冬皂苷 D 对心肌细胞系 H9C2 增殖的结果，和 CCK - 8 法得出的结果一致。所以，活细胞成像系统在细胞毒性分析方面既可行又可靠。
这项研究通过活细胞动态成像及分析系统观察和分析了H2O2在293T细胞中诱导的氧化应激细胞毒性作用和 Dox在CMECs中诱导的细胞毒性作用。研究结果表明，zenCELL owl 活细胞动态成像及分析系统在培养箱内同时原位监测 24 个细胞样本，捕捉的图像和每个视野里的细胞密度匹配度高，可通过对比细胞增殖和密度差异，定量分析细胞毒性。之前也有研究表明，活细胞动态成像及分析系统分析麦冬皂苷 D 对心肌细胞系 H9C2 增殖的结果，和 CCK - 8 法得出的结果一致。所以，活细胞成像系统在细胞毒性分析方面既可行又可靠。
德国InnoME公司自主研发和生产的zenCELL owl活细胞动态成像及分析系统，基于非标记、非侵入方法，原位记录细胞实时生长和定量的分析数据。zenCELL owl体积小巧，耐温耐湿，可在细胞培养箱内长时间连续工作；通过24个显微成像镜头，对24个视野进行连续的动态监测和图像获取。zenCELL owl为用户提供高质量图像、视频、统计学曲线和定量数据，实现细胞增殖／增殖抑制、细胞培养质控／培养优化、迁移／侵袭等诸多活细胞动态过程的监测。
环亚生物，生命科学产品全国性代理商，不断把国外顶级的创新产品引入中国。环亚生物具备完善的公司运营、产品管理、营销、售前技术支持和售后维修体系。环亚生物作为zenCELL owl大中华区独家代理商，负责zenCELL owl产品大中华区的营销和售后支持。
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