智能热板仪,热板测痛仪(热板法)
【目的】
1.掌握镇痛药的实验法。
2.观察罗通定的镇痛作用。
【原理】
热板法是镇痛药物筛选中常用的一种方法,也是一种能确定区分中枢神经末梢神经镇痛机理的方法,有较广的使用范围,热板法对动物组织损伤最小,动物可反复使用,痛反应潜伏期较长,便于观察及测出药物之间的较小差异,比较出药物作用的强弱快慢及持续时间。
将小鼠置于一定温度的热板上,热刺激小鼠足部产生痛反应,即舔足反应。以小鼠出现舔足的时间作用为痛反应指标,判断药物是否具有镇痛作用。
【器材】 热板仪、天平、注射器等。
【动物】 小鼠
【药品】 0.2%罗通定、生理盐水(NS)
【方法一】
1.预选动物:预选30s内有痛反应的小鼠。将小鼠置于热板仪内,温度55±0.5℃,测定小鼠的痛阈值,测2次,每隔5min测量1次,以小鼠舔后足作为观察指标。
2.分组及给药:取预选合格的小鼠4只,随机分为二组,2只/组,一组:ip生理盐水0.2ml/10g体重;二组:0.2%罗通定 0.2ml/10g体重。
3.给药后20、40min测定痛阈值,若小鼠60s内无痛反应,立即取出,按60s计算。
1、实验前预筛选:以小鼠为例,取若干只小鼠,实验前24h腹部去毛,将小鼠逐只置于(55.0±0.5)℃热板仪上,测定记录小鼠的痛阈值,以舔后足为痛觉指标,挑选痛阈值为5~30s的小鼠进行实验。
2、 给药前痛阈值的测定:将筛选出的小鼠逐只置于热板仪上,各测2次痛阈(间隔10min),取平均值作为小鼠基础痛阈即给药前的正常痛阈值。
3、 给药后痛阈值的测定:在服用镇痛或麻醉药物后,测量小鼠在热盘上舔爪的平均时间,该时间对应的是小鼠服用药物后对热刺激的反应,作为给药后痛阈值。若小鼠在热板仪上60s内仍无痛觉反应,立即取出按60s计算并统计给药前后的痛阈值。
4、痛阈提高的百分率:对两组时间值的比较,评估镇痛或麻醉药物的效果。
计算方式:痛阈提高的百分率=[(给药后的痛阈-基础痛阈)/基础痛阈]×100%。
【注意 】
1、用小鼠,痛阈反应时间超过60s应立即取出以免烫伤足部。
2、室温以15℃左右为宜,过低反应迟钝,过高则敏感。
3、镇痛百分率大于50%时,才能认为有镇痛效力。