多重qPCR核心特点、优势及应用领域的介绍
2025-06-18 来源:本站 点击次数:153知识分享
告别“单打独斗”，多重qPCR支持“团队作战”
JLM干货速递
告别“单打独斗”，多重qPCR支持“团队作战”
JLM干货速递
什么是多重qPCR
多重qPCR是实时荧光定量PCR技术的一种高级形式。它是在同一个PCR反应体系中，同时使用多对引物和多个特异性的探针（或染料），针对两个或两个以上的不同目标核酸序列（靶基因）进行扩增和实时定量检测。简单来说，就是“一管反应，多个目标”。
多重qPCR核心特点与优势
- 并行检测：同时检测多个靶标。
- 节省样本：对珍贵或有限的样本（如临床活检、稀有细胞）特别有价值。
- 节省试剂与时间：比进行多个单重qPCR反应显著减少试剂消耗和操作时间。
- 节省成本：降低了每个靶标检测的成本。
- 减少误差：所有靶标在完全相同的反应条件下进行扩增，减少了管间差异带来的误差，结果可比性更高。
- 提高通量：非常适合高通量筛查和需要同时检测多个指标的应用（如病原体分型、多基因表达分析、SNP分型等）。
- 内参共检：可以轻松地将内参基因与目标基因放在同一个反应中进行检测，提高定量的准确性。
多重qPCR主要应用领域
- 病原体检测与分型（如同时检测多种病毒、细菌或耐药基因）
- 基因表达分析（同时检测多个功能相关基因或通路基因）
- 基因分型（如SNP、插入/缺失检测）
- 转基因检测（同时检测多个转基因元件或品系特异性标记）
- 拷贝数变异分析
- 食品安全检测（同时检测多种过敏原或污染物）
多重qPCR主要类型
多重qPCR主要根据所使用的化学发光方法来分类，主要包括：
- 水解探针法：最常用，高特异高灵敏，多重能力取决于通道数。
- 染料法：成本最低，但特异性低，多重能力有限（依赖Tm差异）。
- 分子信标法：背景低，对点突变鉴别强，设计复杂。
- Scorpions法：速度快灵敏度高，设计最复杂成本最高。
QX系列实时荧光定量PCR系统
杰莱美QX系列实时荧光定量PCR系统最大可实现单管6重荧光检测，6通道96孔检测时间不超过5秒，实现对珍贵样本最大限度的利用和数据挖掘。另外搭配业界领先的荧光定量PCR数据处理软件，QX系列将荧光信号处理、专业的数据计算方法、严谨的统计学分析功能整合为一站式解决方案，从核酸到蛋白研究，满足探索各种科学问题的实验需要，重新定义了科研级荧光定量PCR系统。
基于杰莱美QX系列实时荧光定量PCR系统，设计了六重qPCR实验，首先通过执行DNA系列稀释（最低浓度为100cp/uL），对6个靶标基因进行梯度检测，绘制出如下的标准曲线。如图所示，每个靶标的反应都显示出极好的扩增效率，E值在接近100%的范围内，且R2值均大于0.99，接近1。这些结果证明了QX系列实时荧光定量PCR系统具有卓越的检测性能，支持6靶标的精准检测，可为您的实验提供最大限度的灵活性。
相关文章
更多 >