抗体（Ab）保存和稀释的注意事项
2025-06-26 来源:本站 点击次数:25
抗体（antibody，Ab）是机体在体内存在的外来分子、微生物等抗原物质刺激下，由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白（immunoglobulins，Ig），主要分布在血清中，也分布于组织液及外分泌液中。
抗体的保存和稀释需要特别注意以下几个方面：
一、保存注意事项：
1. 温度控制：
短期保存（12周内使用）：推荐在4℃避光保存，避免反复冻融。
长期保存：对于大多数抗体，分装后保存在20℃或80℃。20℃通常足够，除非说明书特别建议80℃。
1. 特定类型抗体：
将抗体分装成适合一次实验用量的小份，避免反复冻融。
分装体积不宜过小，至少10ul以上，以减少蒸发和管壁吸附的影响。
复融后的抗体一次用不完，应保存在4℃，避免再冻。
3. 避光和防污染：
对于光敏感的抗体，如荧光素标记抗体，应使用棕色管或锡箔纸避光保存。
可加入叠氮钠（0.02% w/v）作为防腐剂，但注意其毒性，避免用于活细胞或体内实验。
4. 运输条件：
一般运输在4℃进行，避免干冰运输，因为干冰运输后需解冻，增加一次冻融过程。
收到后应立即按说明书要求保存。
5. 使用专用稀释液：
有些抗体可能推荐使用特定的稀释液，如不含BSA和有毒防腐剂的即用型抗体稀释液。
二、稀释注意事项：
1. 选择合适的稀释液：
无动物来源蛋白，不含叠氮钠等有毒防腐剂，如李记的通用型抗体稀释液。
2. 计算工作浓度：
根据实验需求准确计算所需抗体体积和稀释液体积。
3. 操作规范：
稀释后立即充分混匀，静置在4℃冰箱保存。
使用后的工作液可在4℃保存46个月，但需注意反应强度变化。
4. 重复使用：
可回收稀释后的抗体工作液，但要监测反应强度，必要时补充原液。
5. 注意背景和特异性：
含有免疫增强剂和稳定剂的稀释液可能提供更干净的背景。
遵循这些注意事项，可以有效延长抗体的活性和使用效率，确保实验结果的准确性和可靠性。
抗体的保存和稀释需要特别注意以下几个方面：
一、保存注意事项：
1. 温度控制：
短期保存（12周内使用）：推荐在4℃避光保存，避免反复冻融。
长期保存：对于大多数抗体，分装后保存在20℃或80℃。20℃通常足够，除非说明书特别建议80℃。
1. 特定类型抗体：
- HRP标记抗体：加50%甘油后于20℃保存，HRP底物需4℃避光保存。5
- 酶联抗体：4℃保存，避免冻融。
- 流式抗体（荧光素标记）：4℃避光保存，不加甘油。
- IgG3同型对照：4℃保存，避免冻融。
将抗体分装成适合一次实验用量的小份，避免反复冻融。
分装体积不宜过小，至少10ul以上，以减少蒸发和管壁吸附的影响。
复融后的抗体一次用不完，应保存在4℃，避免再冻。
3. 避光和防污染：
对于光敏感的抗体，如荧光素标记抗体，应使用棕色管或锡箔纸避光保存。
可加入叠氮钠（0.02% w/v）作为防腐剂，但注意其毒性，避免用于活细胞或体内实验。
4. 运输条件：
一般运输在4℃进行，避免干冰运输，因为干冰运输后需解冻，增加一次冻融过程。
收到后应立即按说明书要求保存。
5. 使用专用稀释液：
有些抗体可能推荐使用特定的稀释液，如不含BSA和有毒防腐剂的即用型抗体稀释液。
二、稀释注意事项：
1. 选择合适的稀释液：
无动物来源蛋白，不含叠氮钠等有毒防腐剂，如李记的通用型抗体稀释液。
2. 计算工作浓度：
根据实验需求准确计算所需抗体体积和稀释液体积。
3. 操作规范：
稀释后立即充分混匀，静置在4℃冰箱保存。
使用后的工作液可在4℃保存46个月，但需注意反应强度变化。
4. 重复使用：
可回收稀释后的抗体工作液，但要监测反应强度，必要时补充原液。
5. 注意背景和特异性：
含有免疫增强剂和稳定剂的稀释液可能提供更干净的背景。
遵循这些注意事项，可以有效延长抗体的活性和使用效率，确保实验结果的准确性和可靠性。
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