细胞计数仪与活细胞成像仪助力病毒转染实验效率翻倍
2025-07-15 来源:本站 点击次数:79病毒是一类非细胞性病原体，其结构很简单，主要结构包括核酸和结构蛋白，部分病毒还存在一些脂质包膜，就像HIV和流感病毒。HIV（人类免疫缺陷病毒1型）是一种包膜型逆转录病毒，其病毒粒子由包膜（envelope）、衣壳（capsid）和病毒核心（viral core）构成，各组分通过精密组装实现宿主细胞感染及复制功能。
除了我们常见的HIV之外，我们日常中常见的病毒其实还有很多种，包括慢病毒，腺病毒，腺相关病毒和逆转录病毒。其中慢病毒常被用于细胞转染来获得过表达基因产物；腺病毒常被用于疫苗开发，肿瘤治疗和瞬时基因表达研究；腺相关病毒会被用在遗传病治疗，例如脊髓性肌萎缩症，包括神经科学的研究以及眼科疾病的研究；逆转录病毒，因为仅感染分裂期的细胞，因此它的核心应用一般都是在造血系统的改造和体外基因编辑上，也因为它具有稳定的整合能力，并且能够快速获得扩增的细胞，因此通常会被用在基因编辑中。
病毒作用机制
以慢病毒载体为例，慢病毒与宿主细胞表面的受体结合后，它会通过受体结合的方式来进入细胞，同时将外源基因释放到细胞质中，由于细胞核是多孔的结构，所以病毒的遗传物质很容易入核，并在细胞核中表达。
病毒转染过程中可能存在的问题以及解决方案
在病毒转染过程中往往存在一些难以把控的因素，如病毒的拷贝数、细胞处于分裂期的具体情况、后期转染效率的监测、安全性问题等。在这些过程中，我们需要做好标准化的处理和应对。
①转染前准备： 严格控制起始转染细胞梳理。选择细胞计数仪精准测定细胞密度，确保转染时细胞处于最佳生长状态（如70-80%汇合度），避免因细胞量偏差导致转染失败！
②实时监控、数据可靠：活细胞成像仪全程无创追踪转染后细胞动态：从病毒吸附到基因表达，荧光标记一目了然！还能分析细胞存活率，告别“盲测”时代。支持长时间动态追踪，减少人工取样误差，提供有效数据。
③转染效率快速检测：前期确认合适转染条件后，考虑外来基因整合到宿主细胞长期传代可能导致目的基因丢失，可借助细胞分析仪对细胞荧光表达进行鉴定。通过细胞分析仪能够非常直观地判断出长期传代后的基因表达水平，并及时对丢失掉目的基因的细胞进行再次转染，稳定基因表达强度。
病毒转染专属实验流程
①选择合适的细胞培养板并接种适量的细胞
②基于实验需求，设置实验组和对照组
③质粒转染
④细胞样本置于培养箱中活细胞成像仪上稳定培养观察记录
⑤转染结果分析，使用JuLI Stage活细胞成像仪延时成像监测，自动生成视频，基于图像进行转染效率定量
JuLI Stage 活细胞成像仪助力转染实验文献案例
维也纳医科大学癌症研究中心实验组于Drug Resistance Updates ( IF 15.8 ) 发表文献，其中HEK293 细胞中转染 pRetroX-G1-mCherry-puro，向细胞中加入多柔比星 （DOX）、 顺铂 （CIS） 或奥拉帕尼 （OLA）处理120 小时，使用JuLI Stage活细胞成像仪每半小时拍摄一次，监测转基因表达。通过结果可以实时对比观察在不同处理下转染效率的差异，与对照组相比，细胞处理后在 G1 期逐渐积累，导致生长停滞。
高效转染，工具先行！病毒转染实验的挑战在于细节的把控。精准的细胞计数是成功的前提，实时的活细胞成像则是洞察过程、验证结果的利器。细胞计数仪与活细胞成像仪的强强联合，通过提供起始点的精确性和全过程的透明化，真正实现了实验效率的“翻倍”。告别模糊与猜测，拥抱精准与高效——让这两款必备工具成为您病毒转染实验流程中的标准配置，显著提升您的研究产出与成功率。
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