《细胞探险队》旅程更新！继T（Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78）、B（Raji、Daudi、Ramos、DB）淋巴细胞系、单核-巨噬细胞系（Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1）的培养合集后，这次探索的是NK细胞系！紧跟《细胞探险队》，开启细胞培养的奇妙之旅：覆盖上百种细胞系，积累干货经验和技巧，让细胞培养不再难！各位童鞋，如果有想要了解的细胞系或者遇到哪些问题，也欢迎留言~
NK-92
1. 名称：NK-92（人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞）
2. 别称：NK92、Natural Killer-92、NK-92.05、Neukoplast、aNK12
3. 简介：NK-92是从一名50岁男性非霍奇金淋巴瘤患者的外周血单核细胞中分离并建立，经EB病毒（EBV）转染诱导永生化，从而形成持续增殖的NK细胞系。
4. 种属：人
5. 组织来源：外周血
6. 生长特性：悬浮细胞
7. 应用：肿瘤免疫治疗研究；CAR-NK开发；药物筛选；临床前研究等。
8. 细胞形态：淋巴母细胞样
图片来源于ATCC
9. 培养条件：
（1）完全培养基配方：MEMα（SH30265.01）＋12.5%FBS（SV30208.02）+100-200 U/ml IL-2（UA040057-50μg）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10. 换液频率：2-3次/周，可通过补充新鲜培养基（半量换液）或者离心换液两种方式进行换液
11. 传代周期： 当细胞密度达到1-2*10^6/mL可进行传代
12. 传代比例：1:2-1:3
13. 冻存液配方：90%完全培养基+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14. 注意事项：
（1）培养基中必须持续补充IL-2（浓度≥100 U/mL），否则细胞48小时内死亡；
（2）NK-92轻度聚集为正常现象，但大面积结块可能提示状态不佳，可轻柔吹打（避免剧烈震荡或过滤）或降低细胞密度（高密度易加剧聚集）来减轻结块现象；
（3）避免过度离心：离心速度≤300×g。
NK-92MI
1. 名称：NK-92MI (人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
2. 别称：NK-92 MI、NK-92 mi、NK92-MI
3. 简介：NK-92MI细胞是转染得到的源自NK-92细胞的IL-2非依赖的NK细胞株。
4. 种属：人
5. 组织来源：外周血
6. 生长特性：悬浮细胞
7. 应用：三维细胞培养；免疫学。
8. 细胞形态：淋巴母细胞样
图片来源于ATCC
9. 培养条件：
a) （1）完全培养基配方：MEMα（SH30265.01）＋12.5%FBS（SV30208.02）＋12.5%马血清（abs989）+0.2mM Inositol（abs816057）＋0.1mM β-巯基乙醇（abs9592-100mL）＋0.02mM Folic Acid（abs812845）＋1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10. 换液频率：2-3次/周，可通过补充新鲜培养基（半量换液）或者离心换液两种方式进行换液
11. 传代周期：当细胞密度达到1*10^6个/mL时进行传代，维持细胞密度2-3*10^5个/Ml
12. 传代比例：1:3
13. 冻存液配方：90%FBS+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14. 注意事项：
（1）细胞偏圆或偏椭圆，透亮，成团生长。只有成团的细胞有增殖活性，单个的细胞基本没有增殖活力；
（2）细胞刚复苏或密度较低时，可以先把培养瓶立起来，促进细胞聚团。当细胞正常聚团后，可以将培养瓶平放培养细胞，以增大空气交换面积；
（3）传代时可将大的细胞团轻轻吹散成小团，但是不要吹散成单个细胞（单个细胞基本没有增殖活力）。
YT
1. 名称：YT（人NK细胞白血病细胞）
2. 别称：YT-0
3. 简介：YT细胞是从人NK细胞白血病患者的外周血中分离出的自然杀伤（NK）细胞系，具有快速增殖特性。
4. 种属：人
5. 组织来源：外周血
6. 生长特性：悬浮细胞
7. 应用：NK细胞功能；免疫治疗；血液肿瘤研究。
8. 细胞形态：巨噬细胞样
图片来源于网络
9. 培养条件：
（1）完全培养基配方：RPMI-1640（SH30809.01）+10%FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10. 换液频率：2-3次/周，可通过补充新鲜培养基（半量换液）或者离心换液两种方式进行换液
11. 传代比例：1:2-1:3
12. 冻存液配方：55% RPMI-1640+40%FBS+5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
13. 注意事项：
（1）细胞易聚集成团，传代前可轻轻吹打分散；
（2）若添加IL-2，需定期更换培养基以维持细胞活性。
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