代谢相关脂肪性肝病（metabolic associated steatotic liver disease，MASLD），原称为非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD），是一种以肝脏脂肪蓄积为特征的疾病，已成为全球最常见的慢性肝病，影响着全球约25%的人口。其中20-30%的MASLD患者会发展为更为严重的代谢相关脂肪性肝炎（MASH），意味着全球约有5-7.5%的人口可能患有MASH。

2008年，Romeo等通过全基因组关联分析（GWAS）发现PNPLA3基因SNP位点rs738409的C/G突变（对应PNPLA3蛋白第148位氨基酸148I、148M）与肝脏脂肪沉积相关，GG突变人群肝脏脂肪水平是其他人群的2倍^[1]。此后，多篇文章研究反复验证PNPLA3 I148M与MASLD密切相关。

PNPLA3概述

PNPLA3（patatin-like phospholipase domain containing 3）基因编码一种称为adiponutrin的蛋白质，主要在肝脏和脂肪组织中表达，具有甘油三酯水解酶和乙酰辅酶A依赖性溶血甘油三酯酰基转移酶活性，在脂质代谢中发挥着重要调控作用。

以往较为流行的假说有两种，一种认为PNPLA3作为一种甘油三酯水解酶，148M突变会导致其活性下降，从而减少甘油三酯的水解，即功能缺失（loss-of-function）^[2]；另一种假说认为PNPLA3 148M突变会破坏PNPLA3的泛素化和蛋白酶体降解，最终导致蛋白在脂滴上积累，形成“占位效应”，即功能获得（gain-of-function）^[3]。最新的研究发现^[4]，PNPLA3可以与肝脏中最重要的甘油三酯水解酶ATGL竞争其激活因子ABHD5，从而抑制肝脏中ATGL介导的脂质水解。正常情况下，PNPLA3的表达随着食物摄取而增高，在饥饿状态下则会快速降解。PNPLA3 148M 突变导致PNPLA3的泛素化降解减少，从而富集在脂滴表面，持续抑制ATGL的活性，导致肝脏中脂质的累积。最终驱动肝细胞气球样变、免疫细胞浸润及星状细胞活化，形成脂肪性肝炎-纤维化级联反应。
 

图1. PNPLA3 I148M 遗传变异与肝细胞脂肪肝病关联机制示意图^[5]

靶向PNPLA3治疗策略

PNPLA3 I148M突变作为MASLD的治疗靶点，包括基因沉默、蛋白降解及小分子抑制策略，已成为全球肝病新药研发的前沿焦点。

图2. 潜在PNPLA3治疗策略示意图^[5]

寡核苷酸药物：通过RNA干扰（如反义寡核苷酸、siRNA）降低PNPLA3突变蛋白表达，可改善肝脏脂肪变性和炎症。阿斯利康最近公布了AZD2693注射液的最新结果：AZD2693能有效降低肝脏 PNPLA3 mRNA（−89%）和肝脂滴上的蛋白质水平。在临床应用上，总体耐受性良好，没有出现因不良事件导致停药的情况，也未发生与治疗相关的严重不良事件。

图3. AZD2693临床结果概述^[6]

​小分子药物：辉瑞的PF-07853578是一种靶向PNPLA3 I148M突变体的小分子共价抑制剂，通过分子氨基甲酸酯基团与 PNPLA3 I148M 变体共价结合，促使突变蛋白从脂滴中清除，并进一步通过蛋白酶体途径降解致病蛋白。目前，PF-07853578已完成了1期临床试验（NCT05890105）。

蛋白降解：尽管目前尚无基于PROTAC（蛋白水解靶向嵌合体）技术的药物，但一项关键临床前研究成功开发了靶向PNPLA3的降解剂PROTAC 3。该分子结构包含两个关键域：E3泛素连接酶招募域和靶蛋白结合域。结果表明，在表达人源PNPLA3 148M突变蛋白的小鼠肝脏中，PROTAC 3处理显著降低突变蛋白水平，并改善了与突变蛋白表达相关的脂肪肝病。

图4. PROTAC介导的Halo-PNPLA3(148M)蛋白降解显著降低肝脏甘油三酯^[7]

PNPLA3靶点药物研发现状

尽管目前全球尚未有靶向PNPLA3的药物获批上市，但该靶点因其在MASLD致病机制中的核心地位，已成为肝病领域最具潜力的突破方向之一。现有研发管线高度聚焦于基因特异性干预策略，其中siRNA/ASO等小核酸药物通过精准靶向PNPLA3 I148M突变等位基因，显著降低致病蛋白表达，已占据临床开发的主导地位。这种积极布局凸显出PNPLA3靶点的巨大市场潜力。

表1. 部分靶向PNPLA3靶点药物研发进展

南模生物相关小鼠模型

南模生物长期致力于药物靶点人源化模型研究领域，针对PNPLA3开发了一系列人源化小鼠模型，可用于MASLD临床前研究和药效评价。

表2. PNPLA3相关靶点人源化小鼠

Smagris等^[8]人的研究中指出，仅在高糖饮食（high-sucrose diet，HSD）诱导下，PNPLA3^I148M/I148M小鼠出现明显的脂肪肝表型。基于此，南模生物构建了HSD诱导的肝脏特异性过表达人源PNPLA3 I148M模型（目录号：NM-XA-242889），该模型表现出类人的脂肪肝特征，在高糖诱导下TG、T-CHO含量显著增加，并伴随脂肪变性、炎症浸润及纤维化。

此外，我们也在肝脏特异性过表达人源PNPLA3 I148M模型上通过GAN饮食诱导构建了MASH模型。

以上模型均适用于MASLD/MASH发病机制研究、靶向PNPLA3的新药药效评价及肝病治疗策略开发。

以HSD诱导的肝脏脂肪变性为例：

图6. HSD诱导6周后各组小鼠肝脏中甘油三酯（TG）和总胆固醇（T-CHO）含量。结果显示，HSD饮食诱导下，肝脏特异性过表达hPNPLA3 I148M小鼠TG、T-CHO含量显著增加。

图7. HSD诱导6周后各组小鼠H&E染色代表图。结果显示，HSD饮食诱导下，肝脏特异性过表达hPNPLA3 I148M小鼠出现明显脂肪空泡（G3，G5）。

图8. HSD诱导6周后各组小鼠Masson染色代表图。结果显示，HSD饮食诱导下，肝脏特异性过表达hPNPLA3 I148M小鼠出现明显纤维化（G3，G5）。