1. 掌握脑立体定位技术的基本原理与操作要点；

2. 熟悉脑立体定位仪及脑图谱的使用方法，为后续神经损毁、刺激、电生理及药理研究打下基础。

脑立体定位技术是一种广泛应用于神经科学领域的精确定位方法。通过脑立体定位仪及脑图谱的配合，可根据颅骨上的解剖标志（如前囟、后囟、耳道、眼眶或矢状缝等）建立三维坐标体系，从而确定脑内特定结构的位置。
这种方法无需直视脑组织即可在皮层下进行药物注射、电刺激、损毁或记录等操作，是神经解剖学、神经生理学、神经药理学及神经外科研究中不可或缺的实验手段。
常见的实验动物包括小鼠、大鼠、猫及部分鸟类等，只要具备完整的外耳道即可使用耳棒进行定位。根据脑图谱提供的坐标数据，即可实现精确操作。

脑立体定位仪（如科月华诚牌脑立体定位仪）、MC-5微操作仪、常规显微外科器械、钻孔针、1ml注射器、生理盐水、3%双氧水、0.4%戊巴比妥钠（现配现用）、75%酒精、碘伏、纱布、干棉球、实验用小鼠。

在正式实验前，应对脑立体定位仪进行全面校准：

• 检查电极移动架三维滑尺是否保持垂直，利用三角板确认直角精度；

• 检查各连接部件和螺丝是否松动，滑尺是否灵活；

• 确认主框两臂平行、耳杆装置对称，小框与主框保持水平；

• 将耳杆前后滑动，确保刻度一致，尖端相互对准；

• 取下耳杆后安装电极移动架，反复校准电极尖端与耳杆中心点位置，确保三个滑尺读数一致；

• 最后用水平仪调整前后、左右滑道水平，保证定位基准面准确。

小鼠脑定位常用两种方式：
（1）耳间线定位法：
将两耳棒尖端在仪器滑道中相接，确保读数一致并固定。以耳棒中心点为A点（耳间线中心），记下坐标。再将定位针移动至门齿钩上方接触其平面，设定为H0（水平原点）。此时前囟与后囟基本在同一水平面上。
（2）颅骨标志定位法：
以前囟为原点（前后方向0点），向前为正，向后为负，其余方向坐标参照耳间线法确定。

（1）动物麻醉
选取体重20–30g的小鼠，称重后按体重计算剂量，用0.4%戊巴比妥钠进行腹腔注射。注射过程中动作要缓慢，密切观察动物反应。

（2）固定动物
将小鼠门齿挂在上颌固定器上，插入一侧耳棒至外耳道后固定，调整头部使其居中，再插入另一侧耳棒并锁紧。最后压下鼻环并固定，使动物头部稳固不动。

（3）头部处理与开颅
剪去头顶部毛发，用碘伏和75%酒精交替消毒。沿矢状缝纵向切开皮肤约3cm，轻轻剥离皮下组织。用双氧水清除颅骨表面筋膜与血迹，暴露前囟、人字缝及矢状缝。

（4）定位参照
将定位针垂直移动至矢状缝上方，调整至前囟点，记录坐标值作为基准。

（5）目标区域定位
以小鼠海马为例：前囟后移2mm，矢状缝旁开2.5mm，即为目标定位点。在该点钻一微小圆孔，避免穿透硬脑膜。

（6）药物注射
将1ml注射器吸入药液，安装于MC-5微操作仪上，使针尖缓慢下降2mm至海马区，完成注射。注射后停针片刻，再缓慢拔出，防止药液回流。

（7）定位验证
实验结束后，可通过红色示踪染料注射并制作脑切片，显微镜下观察染料分布，验证注射部位是否准确。

1. 操作仪器时轻拿轻放，防止碰撞损坏；

2. 严格按照仪器使用范围选择实验动物；

3. 实验后及时清洁仪器，保持滑道与螺纹的顺畅；

4. 定期检查刻度与水平是否偏移，确保数据准确性。

脑立体定位技术以其高精度和可重复性，在神经科学研究中具有不可替代的地位。掌握该技术，不仅能实现脑区精确注射、损毁或电刺激，还能为药物作用机制及脑功能研究提供重要工具。使用科月华诚脑立体定位仪，可在操作灵敏度、标尺精度及稳定性方面获得更高实验效率与结果可靠性。