Cisplatin顺铂肾损伤模型构建方法及溶解方案介绍
2025-10-23 来源:本站 点击次数:36
Cisplatin (CDDP) 是一种抗肿瘤的化疗剂,它与 DNA 交联引起癌细胞中 DNA 损伤。Cisplatin 可激活铁死亡 (ferroptosis) 并诱导自噬 (autophagy)。目录号: HY-17394;纯度: 99.30%;别名:顺铂; cis-Platinum; CDDP; cis-Diaminodichloroplatinum。产品链接请访问:https://www.medchemexpress.cn/Cisplatin.html
Top, FHs 74 cells were pretreated with mannose and then cisplatin. Bottom, cells were pretreated with mannose and DON (40 μM) and then cisplatin.
体内研究
(In Vivo)
Cisplatin 可用于诱导急性肾损伤模型[7][8]。
诱导急性肾损伤 (AKI)[7][8]
致病原理
顺铂引起的急性肾损伤 (AKI) 的发病机制复杂,氧化应激、线粒体功能障碍、炎症和细胞凋亡都参与顺铂诱导的 AKI 的进展。氧化应激是顺铂诱导的 AKI 损伤的主要机制。
具体造模方法:
小鼠:C57BL/6 • 雄性 • 6 周龄 (处理:2 周)
给药方式:5 mg/kg • 腹腔注射 • 每天 1 次,共 2 周
Note
(1) 建议使用雄性小鼠,因为雌性小鼠对肾损伤的抵抗力更强。
(2) 小鼠在诱导前 18 小时可以禁食物和水。给药之后,可以给与食物和水。
(3) 顺铂可以溶解在无菌盐水中来制备注射工作液,注意避光。
造模成功指标
代谢变化:血清肌酐 (SCr),血尿素氮 (BUN) 水平,中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (NGAL),硝基酪氨酸 水平升高。
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体外研究
(In Vitro)
Cisplatin (CDDP) 以剂量依赖性方式引起 HeLa 细胞凋亡,浓度为 30 μM 的 Cisplatin 导致 24 小时处理后 90% 以上的细胞死亡。使用 30 μM 浓度检查 Cisplatin 诱导的细胞凋亡的动力学。Cisplatin 激活 MEK/ERK 信号通路,20 和 30 μM Cisplatin 均会导致显著的细胞凋亡,导致 ERK 的强烈激活[1]。
Cisplatin (50 μM) 在肾近端小管细胞 (RPTC) 中产生时间依赖性细胞凋亡,导致细胞收缩,半胱天冬酶 3 活性增加 50 倍,磷脂酰丝氨酸外化增加 4 倍,以及 5-和染色质浓缩和 DNA 亚倍体分别增加 15 倍[2]。
细胞实验溶解度:
DMF 中的溶解度 : 10 mg/mL (33.33 mM);H2O 中的溶解度 : 1 mg/mL (3.33 mM)。超声助溶 (<60°C); DMSO can inactivate Cisplatin's activity
动物实验溶解方案:
以下溶解方案,请直接配制工作液。建议现用现配,在短期内尽快用完。
方案 一
请依序添加每种溶剂: PBS
Solubility: 0.91 mg/mL (3.03 mM); 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C)
方案 二
请依序添加每种溶剂: Saline
Solubility: 2 mg/mL (6.67 mM); 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C)
方案 三
请依序添加每种溶剂: 0.5% CMC-Na/saline water
Solubility: 20 mg/mL (66.66 mM); 悬浊液; 超声助溶
Help & FAQs
为什么不建议用 DMSO 溶解呢?
DMSO 会使顺铂失活,参考文献 PMID: 24812268。
必须避光吗?实验室没有避光 EP 管,影响使用吗?
是的,需要避光保存,也可以用铝箔包一下。