关键词：非实质细胞；猴肝星状细胞；猴库普弗细胞；猴肝窦内皮细胞；猴肝内胆管上皮细胞；猴免疫细胞；原代肝细胞；猴原代肝细胞；肝靶点；肝递送；Non-Parenchymal Cells, NPCs；Monkey Hepatic stellate cells，HSCs; Monkey Kupffer cells, KCs; ;Monkey Liver Sinusoidal Endothelial Cells, LSECs; Monkey Intrahepatic biliary epithelial cells,IBEpiCs;Monkey Immune cells; Primary hepatocytes；Primary Cynomolgus Monkey Hepcotytes,PCH; Liver-Targeted；Liver Delivery

肝脏（Liver）是药物代谢的重要器官，体外代谢模型多以肝脏为基础。其中，原代肝细胞（Primary hepatocytes）作为一种肝脏体外模型，因具有较好的体外试验重现性，基本维持了肝脏的代谢功能，特别是较好的保留了与体内一致的酶水平，成为了体外药物试验的“金标准”，广泛应用于药物代谢与毒理学等研究中。通常，我们所说的原代肝细胞（Primary Hepatocytes）即指的是肝实质细胞，占据肝脏总体积的60%，而剩余的40%则由非实质细胞（Non-Parenchymal Cells, NPCs）组成，主要包括肝星状细胞（Hepatic Stellate Cells, HSCs）、库普弗细胞（Kupffer Cells，KCs）、‌肝窦内皮细胞（Liver Sinusoidal Endothelial Cells, LSECs）、肝内胆管上皮细胞（Intrahepatic biliary epithelial cells,IBEpiCs)和部分免疫细胞（Immune cells）。这些非实质细胞（Non-Parenchymal Cells, NPCs）肝脏结构、功能、免疫调节以及疾病发展中起着重要作用。

此外，合适的模型对于药物非临床体外代谢研究而言更是锦上添花！其中，猴作为非人灵长类动物，其遗传背景、生理结构和代谢途径与人类高度相似，这使得其原代细胞成为预测人类药物反应的"黄金标准"。因此，IPHASE作为体外研究生物试剂引领者，现已有猴肝星状细胞(Monkey Hepatic stellate cells，HSCs)、猴库普弗细胞（Monkey Kupffer cells，KCs）、猴肝免疫细胞（Monkey Liver Immune cells），包含猴T细胞、猴B细胞和猴NK细胞等产品，并正同步研发猴肝窦内皮细胞（Monkey Liver Sinusoidal Endothelial Cells）和猴肝内胆管上皮细胞（Monkey Liver Sinusoidal Endothelial Cells, LSECs），请大家持续关注。

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01 猴肝星状细胞 Monkey Hepatic Stellate Cells, HSCs
肝星状细胞（Hepatic Stellate Cells, HSCs），位于肝脏窦周隙（Disse间隙） 中，即存在于肝细胞与肝血窦内皮细胞之间的狭小空间，属于肝非实质细胞的一种，约占30%左右。在正常状态下，HSCs形态不规则，有多个长的树突状突起，部分突起包绕肝血（类似于周细胞），且其最显著的特征之一是其胞质内含有大量富含维生素A（视黄醇）的脂滴。

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正常情况下HSCs表现为富含VitA脂滴的静止型，其主要功能和特征如下：
· 代谢和贮存VitA 肝脏储存有体内80%左右的维生素A，对体内维生素A的代谢起着重要作用。视黄醛在小肠内酯化后被运输到肝脏并与特异的视黄醛结合蛋白结合，然后转运到邻近的HSC储存。
· 储存脂肪 正常HSC胞质内的脂滴含有大量的甘油三酯，为肝细胞提供能源。
· 合成和分泌胶原及糖蛋白、蛋白多糖等基质成分 HSC是正常及纤维化肝脏中细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）的主要合成细胞。HSC还能合成纤维连接蛋白、层连蛋白和粗纤维调理素等糖蛋白成分，以及硫酸皮素、硫酸软骨素和透明质酸等蛋白多糖。
· 合成基质金属蛋白酶及其组织抑制剂正常情况下，HSC能分泌多种胶原酶和基质降解蛋白酶如基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinase，MMP）-1、MMP-2等以降解各种细胞外基质,同时分泌组织金属蛋白酶抑制剂（tissueinhibitorofmetalloproteinase，TIMP-1）防止胶原过度降解,使肝脏ECM的合成和分解处在一个动态平衡中。
· 表达细胞因子及受体正常情况下，HSC可以分泌肝细胞生长因子（HGF），参与肝细胞再生的调控。此外，HSC还能表达少量的转化生长因子（transforminggrowthfactor-β，TGF-β）、血小板衍生的生长因子（Plateletderivedgrowthfactor，PDGF）和胰岛素样生长因子（IGF）等，同时HSC能表达TGF-β1的II、III型受体和PDGF受体的α亚单位等。
· 参与肝窦血流调节HSC伸出胞突包绕着肝窦，通过其纤长突起的收缩功能调节肝窦内微循环，从而影响着肝脏的血流分布和门静脉压力。

然而，当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时，肝星状细胞被激活，其表型由静止型转变为激活型，是形成肝肌成纤维细胞和引发多种疾病的关键。深入了解肝星状细胞的生物学特性和调控机制，对于预防和治疗肝纤维化、肝硬化及其相关并发症（如门静脉高压、肝癌）具有极其重要的意义，且在近年来，HSCs因其独特的生物学特性正逐渐成为肝靶向（Liver-Targeted）和肝递送（Liver Delivery）研究的热点。

02 猴库普弗细胞 Monkey Kupffer cells，KCs
Kupffer细胞（Kupffer Cells, KCs），即库普弗细胞或枯否细胞，也称肝脏巨噬细胞（Hepatic Macrophages），是位于肝脏中的特殊巨噬细胞，是单核吞噬细胞系统的一部分，约占机体巨噬细胞总数的80-90%。Kupffer细胞定居于肝血窦中，与血管内皮细胞相毗邻，在肝小叶间静脉周围常见。

Kupffer细胞具有吞噬、分泌功能、免疫调节与监视作用。生理条件下，Kupffer细胞不仅能非特异地吞噬和清除血流中的细菌、病毒、内毒素和衰老红细胞等物质，而且还具有特异性的免疫应答、抗肿瘤免疫、内毒素解毒、抗感染、调节微循环及物质代谢等方面的作用。Kupffer细胞可分泌多种细胞因子（如白细胞介素、肿瘤坏死因子），参与激活或抑制免疫反应。在病毒感染时，Kupffer细胞通过呈递抗原激活T淋巴细胞，启动特异性免疫应答。同时，它们也能通过释放抗炎因子减轻过度炎症反应，避免肝组织损伤。另外，库普弗细胞表面存在着多种受体，可被多种配体激活，通过产生细胞因子、炎症介质和活性氧等，在多种肝细胞损伤的发病过程中起到重要的作用。

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总之，Kupffer细胞（Kupffer Cells, KCs）在清除血液中的有害物质、调节免疫反应及维持肝脏微环境稳定方面发挥重要作用，并与多种肝脏疾病的发生和发展密切相关。利用Kupffer细胞构建肝脏疾病相关3D细胞模型和类器官，可为肝脏疾病机制和药物筛选提供更加高效的体外研究模型，更可用于肝靶向（Liver-Targeted）或肝递送（Liver Delivery）药物的优化研究工具之一！

03 猴肝免疫细胞 Monkey Liver Immune cells
猴肝脏不仅是代谢和解毒的核心器官，同时也是重要的免疫调节中心，富含多种淋巴细胞亚群，包括B细胞、T细胞、自然杀伤细胞（NK细胞）和自然杀伤T细胞（NKT细胞）。这些细胞在肝脏独特的免疫微环境中相互作用，共同维持免疫监视、抗感染、炎症调控和免疫耐受的平衡。肝脏作为一个“免疫器官”的特殊性在于其直接接收来自肠道门静脉的血液，使其持续暴露于食物抗原、微生物产物和潜在病原体，因此需要精细的免疫调控机制来区分无害物质和有害威胁。

在灵长类（如猴）肝脏中，淋巴细胞的组成和功能与外周免疫系统存在显著差异。例如，肝脏富含先天免疫细胞（如NK和NKT细胞），而传统适应性免疫细胞（如B细胞和常规T细胞）的比例相对较低。这种独特的细胞分布使肝脏能够快速响应血源性感染（如病毒、细菌或寄生虫），同时避免对无害抗原（如食物蛋白或共生菌成分）产生过度炎症反应。

NK细胞
【特征】
①猴肝脏中NK细胞比例较高（约15-30%），尤其在肝窦中富集。
②其表型为CD56+（猴可能为CD16+）、NKG2D+、NKp46+，部分为组织驻留型（CD69+）。

【功能】
①直接杀伤：通过穿孔素/颗粒酶或死亡受体（如FasL）杀死肿瘤或病毒感染的肝细胞。
②分泌IFN-γ、TNF-α等细胞因子；
③与肝窦内皮细胞相互作用，参与免疫调节。

NKT细胞
【特征】
①兼具T细胞（TCRαβ+）和NK细胞（如NK1.1+）标志，识别CD1d提呈的脂类抗原；
②猴肝中NKT细胞比例显著高于外周血（约5-20%）；
③分为两个亚型：
Ⅰ型（经典NKT）：表达半恒定的TCR（Vα24-Jα18），快速分泌Th1/Th2细胞因子；
Ⅱ型（非经典NKT）：TCR多样性更丰富，功能尚不明确。

【功能】
①双向调节：可促炎（IFN-γ）或抗炎（IL-4、IL-10），依赖微环境信号；
②肝损伤与修复：在药物性肝损伤（如猴模型中的对乙酰氨基酚毒性）中起关键作用。

T细胞
【特征】
分为三个亚型：
CD4+ T细胞（辅助性T细胞）：分泌IFN-γ、IL-4等细胞因子，调控B细胞和CD8+ T细胞应答；在肝纤维化中可能促进炎症（Th1）或抑制免疫（Th2）。
CD8+ T细胞（细胞毒性T细胞）:占肝脏T细胞的主要部分（猴肝中可达50-70%），具有直接杀伤病毒感染肝细胞的能力；常表达活化标志（如CD69）和记忆标志（CD44）。
调节性T细胞（Treg）：表达FoxP3，抑制过度免疫反应，维持肝脏免疫耐受。

【功能】
①清除病毒感染的肝细胞（如猴免疫缺陷病毒SIV）；
②在肝移植免疫中参与排斥或耐受。

B细胞
【特征】
①猴肝脏中B细胞比例较低（约占肝脏淋巴细胞的5-15%），主要分布在门静脉周围和肝窦；
②表达CD19、CD20和表面免疫球蛋白（sIg），部分为记忆B细胞（CD27+）。
【功能】
①抗体产生：在病原体（如肝炎病毒）刺激下分化为浆细胞，分泌特异性抗体；
②抗原呈递：通过MHC-II分子激活T细胞；
③免疫调节：分泌细胞因子（如IL-10）调节炎症反应。
④在慢性肝病（如猴B病毒感染）中可能参与自身抗体产生或免疫耐受。

总之，猴肝脏的免疫研究对理解人类肝病（如病毒性肝炎、肝纤维化、肝癌）的发病机制具有重要意义，也为器官移植和自身免疫病研究提供了独特视角。未来，通过单细胞测序、多色流式等技术深入解析猴肝脏淋巴细胞的异质性，将有助于揭示新的免疫治疗靶点，推动肝病精准医学的发展。

04 猴肝窦内皮细胞 Monkey Liver Sinusoidal Endothelial Cells, LSECs
肝窦内皮细胞（Liver Sinusoidal Endothelial Cells, LSECs）是肝脏中一种特殊的内皮细胞，位于肝窦（肝血窦）内壁，构成肝窦的血管内衬，占据了肝非实质细胞的70%。 LSECs富含窗孔以及缺乏内皮下完整基底膜使之成为哺乳动物体内最具有渗透性的内皮细胞，通过允许血浆中小分子自由通过和阻挡较大颗粒的形式来参与物质交换和代谢调节。与此同时，LSECs表面表达丰富的受体如SR-BI,和Stabilin-1/2等，可高效吞噬血液中的大分子废物、病原体、衰老蛋白甚至是纳米颗粒，因此，LSECs是体内重要的“血液净化器”。

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LSECs是重要的药物代谢参与者，尤其是首过代谢的重要成员。它们富含多种清除受体（如清道夫受体、甘露糖受体、Fc受体等），能主动摄取并降解血液中的多种内源性物质（如透明质酸、变性蛋白）和外源性物质，包括某些药物分子、纳米载体或大分子生物制剂（如寡核苷酸、抗体药物偶联物片段）。这种清除作用可能影响药物的全身暴露量、药代动力学特性和药效。同时，LSECs表达多种药物代谢酶（如CYP450同工酶，虽然活性通常低于肝细胞）和药物转运体，能进行部分I相和II相代谢反应，直接参与某些药物的转化或失活过程，补充肝细胞的代谢功能。理解LSECs对特定药物的摄取和代谢能力对于预测药物体内命运至关重要。总之，LSECs主要通过发挥抗炎、内吞、分泌促血管生成信号分子和维持HSCs表型等作用, 参与调控非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)、酒精性脂肪肝(alcoholic fatty liver, AFL)、肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)、肝再生、肝纤维化等肝脏病理过程。

最后，在药物安全性评价中，LSECs是肝毒性早期预警的关键哨兵。它们对药物或其中间代谢产物诱导的损伤极为敏感。许多药物（如对乙酰氨基酚过量、某些化疗药、生物制剂）或其活性代谢物可直接损伤LSECs或通过引起氧化应激、炎症反应导致其功能障碍（窗孔收缩/消失，即“毛细血管化”）或死亡。LSECs损伤会破坏肝窦屏障完整性，导致肝窦充血、微循环障碍，并促进炎症细胞浸润和肝星状细胞活化，最终可能发展为肝窦阻塞综合征（SOS/VOD）或其他形式的肝损伤。因此，在临床前研究（尤其是使用非人灵长类模型时）中，密切评估药物对猴LSECs的结构和功能影响，是预测人类潜在肝窦毒性的重要环节，有助于早期淘汰高风险候选药物或设计规避策略。

05 猴肝内胆管上皮细胞 Monkey Intrahepatic biliary epithelial cells,IBEpiCs
肝内胆管上皮细胞（Intrahepatic Biliary Epithelial Cells,IBEpiCs)占肝脏细胞总数的3%～5%，是构成肝内胆管系统的主要功能细胞，分布于肝内二级胆管及其分支以上的胆管系统，主要覆盖肝左叶和右叶的胆管分叉处。IBEpiCs呈立方或柱状，具有顶膜和基底外侧膜，从其顶膜延伸出来的微绒毛和初级纤毛具有特征性，微绒毛使细胞表面积增加了5倍，初级纤毛则能感受机械、化学刺激以及渗透压的改变，是维持其细胞稳态的关键。IBEpiCs的肌动蛋白细胞骨架具有助于维持膜张力、稳定细胞形态和调节囊泡运输的功能。

IBEpiCs具有分泌与吸收、炎症修复和免疫屏障等作用：

【分泌与吸收】
IBEpiCs的顶膜和基底外侧膜存在不同的离子载体和通道，分泌和吸收各种物质。IBEpiCs主要分泌物之一是胆汁，占胆汁总排出量的40%，其在胆汁生成中至关重要。此外，IBEpiCs还可以吸收胆汁酸、葡萄糖、氨基酸、水和各种离子，通过相关的转运蛋白和通道蛋白实现双向运输。

【炎症与修复】
IBEpiCs参与肝脏损伤引起的炎症和修复反应。IBEpiCs经各种损伤激活后可分泌多种细胞因子和趋化因子，包括转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、IL-8、CCL2、血小板源性生长因子-B（platelet derived growth factor-B，PDGF-B）等，这些因子会以自分泌和旁分泌的方式参与炎症反应，致使IBEpiCs增殖、凋亡和衰老。随着炎症反应加剧，受损胆管周围瘢痕组织过度沉积，引发病理性修复反应。

【免疫屏障】
IBEpiCs拥有复杂的免疫机制，是肝脏免疫调节的重要组成部分，IBEpiCs在未被激活状态下，分泌包含IgA在内的多种抗菌蛋白，具有潜在的抗菌作用和免疫功能。IBEpiCs表达的Toll样受体（toll-like receptors，TLRs），在识别抗原后会分泌抗菌蛋白、炎症性细胞因子和黏附分子。同时，IBEpiCs作为抗原呈递细胞还可表达人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA），促进免疫反应的定位。当IBEpiCs被各种损伤激活后，会分泌TNF-α、干扰素-γ（Interferon-γ，IFN-γ）、IL-6、IL-8、CCL2、CXCL16、HLA等参与免疫调控。

目前已发现肝内胆管上皮细胞在胆汁淤积性肝病（cholestatic liver diseases，CLD）、肝纤维化( Hepatic fibrosis，HF) 和肝内胆管癌（intrahepatic cholangiocarcinoma，ICC）等肝脏疾病中扮演着关键角色。因此，合适的肝内胆管上皮细胞（Intrahepatic biliary epithelial cells,IBEpiCs)模型显得至关重要。而猴作为体外模型的“黄金标准”，猴肝内胆管上皮细胞（Monkey Intrahepatic biliary epithelial cells,IBEpiCs)即是关键的“黄金模型”。

06 IPHASE 产品
综上所述，非实质细胞（Non-Parenchymal Cells, NPCs）虽“默默无闻”，却是肝脏健康的核心调控者。而猴的肝脏结构与人类高度相似，更是研究肝脏疾病的黄金模型。因此，猴肝非实质细胞实现了从免疫防御（T、NK、NKT及Kupffer细胞）到纤维化（Hepatic stellate cells，HSCs），从代谢（Liver Sinusoidal Endothelial Cells, LSECs）到再生（Intrahepatic biliary epithelial cells,IBEpiCs）的全套体外研究模型，在体外共同构成了肝脏的“隐形守护者网络”。

鉴于此，IPHASE作为体外研究生物试剂引领者，为满足市场对高质量猴非实质细胞模型的迫切需求，现已研发、生产出具有高活性、高纯度且批次间差异小的猴肝星状细胞、猴肝星状细胞(Monkey Hepatic stellate cells，HSCs)、猴库普弗细胞（Monkey Kupffer cells，KCs）、部分猴肝免疫细胞（Monkey Liver Immune cells），并正同步研发猴肝窦内皮细胞（Monkey Liver Sinusoidal Endothelial Cells）和猴肝内胆管上皮细胞（Monkey Liver Sinusoidal Endothelial Cells, LSECs）。猴非实质细胞是连接基础科学与临床转化的关键桥梁，更是突破肝病治疗困境的转化医学枢纽，适用于肝脏纤维化机制研究、药物靶点筛选、细胞互作分析及再生医学等领域的探索。

IPHASE生产产品均具有以下优势：
合规性 生产产品的组织均由正规渠道获得，来源清晰。
安全性 生产组织均经过病原检测，保证产品质量安全。
高质量 生产产品均经过严格的内部质控，且同批次数量多，批次间差异性小。

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