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染色质免疫共沉淀ChIP试剂盒的用法及常见实操问题解答

2025-11-12     来源:本站     点击次数:447

做染色质免疫共沉淀(ChIP)实验时,总怕试剂配错、组分漏带导致实验中断?新鲜样本处理后没法立马推进实验,担心影响 DNA 与蛋白质的结合状态?多个样本同步处理,怕批间效应干扰结果准确性?想开展超声法 ChIP 实验,又不想逐个准备缓冲液、抗体等耗材?这款染色质免疫共沉淀(ChIP)试剂盒,帮您解决这些问题!

本试剂盒又称 ChIP Kit、超声法染色质免疫共沉淀试剂盒,专为超声法 ChIP 实验设计,可助力研究 DNA 与蛋白质的结合关系(如基因调控相关的蛋白 - DNA 互作),试剂盒含 26 种完整组分,无需额外采购核心试剂,让实验流程更顺畅。​
 

序号

名称

包装量

保存温度

1

蛋白 A/G 磁珠

450ul

 

 

 

 

 

2-8℃

 

 

 

 

 

2

ChIP 稀释缓冲液

12.5ml

3

低盐洗涤缓冲液

12.5ml

4

高盐洗涤缓冲液

12.5ml

5

Licl 洗涤缓冲液(A+B)

13(6.5+6.5)ml

6

TE 缓冲液

12.5ml

7

细胞裂解缓冲液

5ml

8

细胞核裂解缓冲液

5ml

9

ChIP 洗脱缓冲液(W/O 蛋白酶 K)

5ml

10

10 x 甘氨酸

25ml

11

10 x PBS

60ml

12

离心过滤器 (Gel Recovery Column)

24个





 

  2-8℃

 

 

 

 

 

 

13

2.0 ml接收管 (2.0 ml Collection Tube)

24个

14

1.5 ml接收管 (1.5 ml Collection Tube)

24个

15

激活buffer (Buffer CBS)

7ml

16

结合缓冲液 (Binding Solution)

12ml

17

WA Solution

12.5ml

18

Wash Solution

6ml

19

Elution Buffer

5ml

20

ddH2O

5ml

21

蛋白酶抑制剂混合物,100x DMSO 储液

350µl

 

 

 

-20 ℃

 

22

蛋白酶 K(20mg/ml)

60ul

23

核糖核酸酶 A(10mg/ml)

60ul

24

RNA 聚合酶 II 抗体,克隆号 CTD4H8

25ug

25

Normal Mouse IgG

25ug

26

对照引物

75ul


结合 Miltenyian 在科研试剂应用领域的经验,发现大家在 ChIP 试剂盒实操中常遇到组分保存、样本处理等疑问,为此整理了以下 FAQ,帮您提前厘清关键问题、规避实验风险:​
Q1:ChIP 试剂盒能用于哪种实验?适用研究方向是什么?
A:专为超声法染色质免疫共沉淀(ChIP)实验设计,可用于研究细胞内 DNA 与蛋白质的特异性结合关系,比如基因调控领域中 “调控蛋白与基因启动子区域结合” 的验证、转录因子与 DNA 结合位点的筛选等研究;暂不支持单细胞样本的 ChIP 实验,仅适用于组织或细胞团样本。​
Q2:试剂盒的组分该怎么保存?有效期有多久?
A:需按组分类型分开保存:蛋白 A/G 磁珠、ChIP 稀释缓冲液、低盐 / 高盐洗涤缓冲液、Licl 洗涤缓冲液、TE 缓冲液、细胞 / 细胞核裂解缓冲液、离心过滤器、2.0ml/1.5ml 接收管、激活 buffer、结合缓冲液等大部分组分,需在 2-8℃条件下保存;蛋白酶抑制剂混合物(100x DMSO 储液)、蛋白酶 K(20mg/ml)、核糖核酸酶 A(10mg/ml)、RNA 聚合酶 II 抗体(克隆号 CTD4H8)、Normal Mouse IgG,需在 - 20℃条件下保存。试剂盒整体有效期为 1 年,需避免组分反复冻融。​
Q3:使用试剂盒处理样本时,有什么注意事项?
A:若实验需切割组织样本,建议在试剂盒的缓冲液(如细胞裂解缓冲液)中操作,避免样本暴露在空气中导致细胞损伤;若开展分子生物学相关研究(如后续 DNA 测序),组织样本大小建议不超过 1cm³,减少细胞机械损伤,保证后续实验中染色质的完整性;样本需完全浸没在对应缓冲液(如细胞裂解缓冲液)中,避免因液体不足导致局部细胞失活。​
Q4:试剂盒能支持多少次实验?有没有对照试剂验证结果?
A:试剂盒配备 24 个离心过滤器、24 个 2.0ml 接收管及 24 个 1.5ml 接收管,按单次实验使用 1 套耗材计算,通常可支持 24 次实验(具体次数需根据单次实验的样本量调整,若单次处理多个样本,次数会相应减少);含 75ul 对照引物,实验后可通过 PCR 等方法检测对照引物的扩增结果,验证实验流程是否正确、是否存在非特异性干扰,确保结果可靠。​
Q5:试剂盒中的酶和抗体有什么作用?是否需要额外准备?
A:试剂盒已包含完整的酶与抗体组分,无需额外准备:蛋白酶抑制剂混合物可抑制样本中蛋白降解酶的活性,保护目标蛋白质;蛋白酶 K 可降解实验中产生的非目标蛋白质,减少杂质干扰;核糖核酸酶 A 可去除样本中的 RNA,避免 RNA 与 DNA 结合影响结果;RNA 聚合酶 II 抗体可特异性结合 RNA 聚合酶 II(常见研究目标蛋白),助力目标蛋白 - DNA 复合物的捕获;Normal Mouse IgG 作为阴性对照,用于排除实验中的非特异性结合,提升结果准确性。​
Q6:若部分组分提前用完,能否单独补充?长期不用的组分该怎么处理?
A:目前试剂盒为完整套装,暂不提供单独组分购买服务,建议实验前根据样本数量规划单次用量,避免浪费;长期不用的 - 20℃保存组分(如酶、抗体),可按单次实验用量分装后密封保存,减少反复冻融对活性的影响;2-8℃保存的缓冲液,开封后需注意密封,避免污染,建议 1 个月内使用完毕。
本文章由AI生成,仅用于科普参考。
名称 货号 规格
OCT包埋剂 abs9756-110mL 110mL
染色质免疫共沉淀(ChIP)试剂盒 abs50034-22T 22T
Series S Sensor Chip CM5, 10-pack 29149603 10片
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