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氨基偶联试剂盒的使用步骤及常见问题解答
2025-11-13 来源:本站 点击次数:45
在生物化学和分子生物学实验中,将生物分子(如蛋白质、肽、寡核苷酸等)固定到传感器芯片表面是常见的操作。氨基偶联试剂盒提供了一种高效、可靠的方法,帮助研究人员实现这一目标。
产品简介
氨基偶联试剂盒是一种专门用于将生物分子固定到传感器芯片表面的试剂盒。它通过化学偶联反应,将带有氨基的生物分子与传感器芯片表面的羧基基团连接起来,形成稳定的共价键。这种连接方式适用于多种生物分子,广泛应用于表面等离子体共振(SPR)实验中。
套件组成
1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐 (EDC)
:750 mg
作用:活化羧基基团,使其能够与氨基反应。
N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS)
:115 mg
作用:与EDC协同作用,进一步促进羧基与氨基的反应。
1.0 M 乙醇胺-HCl pH 8.5
:10.5 ml
作用:用于终止反应,防止过度偶联。
储存条件
温度
:2–8°C
注意事项
:试剂盒应保存在干燥、避光的环境中,避免反复冻融。
适用机型
Biacore 8K+
Biacore 8K
Biacore T200
Biacore S200
Biacore X100
样品/试剂容量
容量
:足以进行30至50次偶联反应。
适用范围
:适用于多种生物分子的固定,包括蛋白质、肽、寡核苷酸等。
使用步骤
1. 准备传感器芯片
选择合适的传感器芯片,确保其表面清洁且功能正常。
2. 活化羧基基团
将EDC和NHS溶解在适当的缓冲液中,通常使用0.1 M MES缓冲液(pH 5.0–6.0)。
将活化溶液注入传感器芯片表面,使羧基基团活化。
3. 偶联生物分子
将带有氨基的生物分子溶液注入传感器芯片表面,与活化的羧基基团反应,形成稳定的共价键。
4. 终止反应
使用1.0 M 乙醇胺-HCl(pH 8.5)终止反应,防止过度偶联。
5. 清洗和检查
用适当的缓冲液清洗传感器芯片表面,检查偶联效果。
注意事项
活化溶液的配制
:确保EDC和NHS的浓度准确,避免过高或过低的浓度影响偶联效果。
反应时间
:根据生物分子的性质和浓度,调整反应时间,通常为10-30分钟。
终止反应
:及时使用乙醇胺-HCl终止反应,防止过度偶联导致背景信号增加。
保存条件
:试剂盒应保存在2–8°C的环境中,避免反复冻融。
常见问题解答
Q1:试剂盒可以用于哪些类型的生物分子?
A
:适用于带有氨基的生物分子,如蛋白质、肽、寡核苷酸等。
Q2:试剂盒的保存条件是什么?
A
:2–8°C,避免反复冻融。
Q3:试剂盒可以进行多少次偶联反应?
A
:足以进行30至50次偶联反应。
Q4:使用试剂盒时需要注意什么?
A
:确保活化溶液的浓度准确,调整反应时间,及时终止反应,避免过度偶联。
Q5:试剂盒适用于哪些机型?
A
:适用于Biacore 8K+、Biacore 8K、Biacore T200、Biacore S200和Biacore X100系统。
产品信息
产品名称
:氨基偶联试剂盒
套件组成
:
750 mg 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐 (EDC)
115 mg N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS)
10.5 ml 1.0 M 乙醇胺-HCl pH 8.5
储存条件
:2–8°C
适用机型
:Biacore 8K+、Biacore 8K、Biacore T200、Biacore S200和Biacore X100系统
样品/试剂容量
:足以进行30至50次偶联反应
总结
氨基偶联试剂盒是一种高效、可靠的工具,适用于将带有氨基的生物分子固定到传感器芯片表面。它通过化学偶联反应,确保生物分子与芯片表面形成稳定的共价键,广泛应用于表面等离子体共振(SPR)实验中。试剂盒的组成、储存条件和使用步骤均经过精心设计,确保实验的成功率和重复性。
名称
货号
规格
OCT包埋剂
abs9756-110mL
110mL
MACS Tissue Storage Solution, 100mL
130-100-008
100ml
Amine Coupling Kit
BR100050
1套
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