结合后,通过磁力分离技术快速将磁珠-目标分子复合物与杂质分离,再经洗涤去除非特异性吸附,最终通过改变缓冲液条件(如pH调整、竞争性洗脱)释放高纯度目标产物。该技术兼具高效、温和、可自动化等优势,适用于复杂样本(如血清、细胞裂解液)中微量目标的纯化。
实验步骤(以抗体偶联磁珠为例)

1、样本预处理
离心去杂:将样本(如血清)以3000g离心10分钟,去除细胞碎片或颗粒物。
裂解(可选) :若目标为细胞内成分,使用裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂)处理样本,超声破碎后离心取上清。
2、磁珠孵育
磁珠活化:涡旋混匀磁珠悬液,取适量磁珠置于离心管中,用预冷PBS洗涤2次以去除储存液。
结合目标分子:将预处理样本与磁珠混合,室温旋转孵育30分钟,确保充分接触。
3、磁分离与洗涤
磁吸去上清:将离心管置于磁力架上静置2-3分钟,待溶液澄清后吸弃上清。
洗涤杂质:加入洗涤缓冲液(如含0.1% Tween-20的PBS),轻柔重悬磁珠,重复磁吸步骤2-3次以去除非特异性结合。
4、目标分子洗脱
竞争性或条件洗脱:
酸性洗脱:加入低pH缓冲液(如pH 2.8甘氨酸-HCl),孵育5分钟,中和后立即转移上清以保护目标活性。
生物素竞争:对于链霉亲和素磁珠,加入过量游离生物素竞争性解离目标分子。
磁珠再生(可选) :部分试剂盒支持磁珠再生,通过去离子水、再生缓冲液处理后可重复使用。
总耗时:约60分钟,批间差异<5%,回收率可达90%以上。
产品优势
相关产品
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货号 |
产品名称 |
应用和特点 |
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Protein G琼脂糖磁珠 |
高效纯化IgG,适用于多种物种,减少非特异性结合 |
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Protein A琼脂糖磁珠 |
特异性结合IgG,适用于人、兔、小鼠等物种,高结合容量 |
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His-tag蛋白纯化磁珠(IDA-Ni) |
利用镍离子特异性结合His-tag蛋白,适用于大规模纯化 |
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His-tag蛋白纯化磁珠(IDA-Co) |
利用钴离子特异性结合His-tag蛋白,适用于大规模纯化 |
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His-tag蛋白纯化磁珠(NTA-Ni) |
利用镍离子特异性结合His-tag蛋白,适用于小规模纯化 |
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His-tag蛋白纯化试剂盒(IDA-Ni) |
包含镍离子磁珠和试剂,适用于大规模His-tag蛋白纯化 |
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His-tag蛋白纯化试剂盒(IDA-Co) |
包含钴离子磁珠和试剂,适用于大规模His-tag蛋白纯化 |
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Protein A抗体纯化试剂盒 |
包含Protein A磁珠和试剂,适用于抗体纯化 |
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Protein A/G抗体纯化试剂盒 |
包含Protein A/G磁珠和试剂,适用于抗体纯化 |
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Protein A/G磁珠 |
结合Protein A和Protein G的优点,适用于多种IgG亚型 |
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GST融合蛋白纯化磁珠 |
包含GST磁珠和试剂,适用于GST融合蛋白纯化 |
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GST融合蛋白纯化试剂盒 |
包含GST磁珠和试剂,适用于GST融合蛋白纯化 |
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Strep-tag II蛋白纯化磁珠 |
特异性结合Strep-tag II蛋白,适用于蛋白纯化和分离 |
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Strep-tag II蛋白纯化试剂盒 |
包含Strep-tag II磁珠和试剂,适用于Strep-tag II蛋白纯化 |
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肝素磁珠 |
利用肝素特异性结合某些蛋白,适用于蛋白纯化 |
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DEAE磁珠 |
利用阴离子交换基团特异性结合带负电的蛋白,适用于蛋白纯化 |