非HLA抗体检测新进展：AT1R抗体检测中的干扰因素与特异性验证
2026-01-04 来源:本站 点击次数:137
非HLA抗体检测新进展：AT1R抗体检测中的干扰因素与特异性验证
研究背景
非HLA抗体（如抗血管紧张素Ⅱ1型受体抗体AT1R-Ab）在移植排斥反应中的作用日益受到关注。AT1R-Ab与血管炎症、难治性排斥反应及移植失败风险显著相关。目前，酶联免疫吸附试验（ELISA）是检测AT1R-Ab的主要方法，但其检测结果可能受样本前处理干扰，例如使用吸附珠（AOB）可能导致信号丢失。本研究旨在探究干扰机制，并验证AXE技术对AT1R抗体特异性的评估效果。
参考文献
[1] Dragun et al. NEJM 2005;352:558-569.
[2] Reinsmoen et al. Transplantation 2010;90:1473-1477.
[3] Liwski et al. Front Genet 2022;13:1059650.
文献来源： HLA: Immune Response Genetics. 2025;105:e70268. doi:10.1111/tan.70268
⚠️ 重要提示
本文仅作学术交流，检测方法应用需符合临床规范。数据源于公开研究，不涉及商业推广。
研究背景
非HLA抗体（如抗血管紧张素Ⅱ1型受体抗体AT1R-Ab）在移植排斥反应中的作用日益受到关注。AT1R-Ab与血管炎症、难治性排斥反应及移植失败风险显著相关。目前，酶联免疫吸附试验（ELISA）是检测AT1R-Ab的主要方法，但其检测结果可能受样本前处理干扰，例如使用吸附珠（AOB）可能导致信号丢失。本研究旨在探究干扰机制，并验证AXE技术对AT1R抗体特异性的评估效果。
核心发现
1. BSA是AOB干扰ELISA信号的关键因素
• AOB缓冲液中的牛血清白蛋白（BSA）即使稀释至10⁻⁶仍会显著抑制CellTrend AT1R检测试剂的信号（图1）。
• 其他缓冲成分（如PBS、NaN₃）无此干扰效应（图2a）。
2. AXE技术验证AT1R抗体特异性
• 通过吸附洗脱交叉匹配（AXE）技术从活细胞表面洗脱AT1R-Ab，洗脱效率中位值为30%。
• 洗脱后的抗体在CellTrend与实验室自建（亲和纯化AT1R抗原）ELISA平台上均显示特异性结合（图5）。
3. 抗原呈现方式影响检测准确性
• CellTrend试剂盒使用CHO细胞全裂解物包被ELISA板，可能因非特异性结合导致BSA干扰。
• 实验室自建ELISA采用亲和纯化的AT1R活性形式抗原，AOB处理未引起信号抑制（图4d）。
临床意义与展望
1. 检测标准化需求：BSA干扰提示临床检测需严格遵循试剂盒protocol，避免引入未经验证的样本处理步骤。
2. AXE技术的应用潜力：该技术可特异性分离细胞表面结合的AT1R-Ab，为抗体功能验证提供新工具。
3. 未来方向：需扩大样本量验证活性形式AT1R抗原的临床敏感性，并探索ETAR等非HLA指标的同步检测策略。
参考文献
[1] Dragun et al. NEJM 2005;352:558-569.
[2] Reinsmoen et al. Transplantation 2010;90:1473-1477.
[3] Liwski et al. Front Genet 2022;13:1059650.
文献来源： HLA: Immune Response Genetics. 2025;105:e70268. doi:10.1111/tan.70268
⚠️ 重要提示
本文仅作学术交流，检测方法应用需符合临床规范。数据源于公开研究，不涉及商业推广。
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