一、KRAS突变在结直肠癌靶向治疗中的复杂作用
结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，表皮生长因子受体（EGFR）的过表达是其关键驱动因素之一。针对EGFR的单克隆抗体西妥昔单抗是晚期结直肠癌的重要靶向治疗药物。然而，临床实践表明，约40%的患者对该药物原发耐药，其核心机制与下游KRAS基因的激活突变密切相关。KRAS突变导致其编码蛋白持续处于GTP结合的活化状态，绕过上游EGFR的信号调控，从而驱动肿瘤生长。

值得注意的是，并非所有KRAS突变均导致相同的治疗结局。研究发现，携带KRAS G13D（第13位甘氨酸被天冬氨酸取代）突变的患者，对西妥昔单抗治疗仍可能获益，这揭示了KRAS不同突变亚型之间存在的功能异质性。解析这种异质性背后的分子机制，对于实现精准治疗至关重要。

二、KRAS G13D独特敏感性的分子机制解析
近期，索尔克生物研究所的团队通过整合计算系统生物学与实验验证，阐明了KRAS G13D突变对西妥昔单抗保持敏感性的潜在机制。研究聚焦于肿瘤抑制蛋白神经纤维蛋白1（NF1）的作用。NF1作为RAS GTP酶激活蛋白（RAS-GAP），通过促进GTP水解负向调控野生型RAS的活性。

1. 计算模型预测：研究人员构建了涵盖RAS信号通路的数学模型，模拟并分析了不同KRAS突变体对信号网络的扰动。模型预测，KRAS突变体与NF1的相互作用强度是影响其对EGFR依赖性的关键变量。

2. 实验验证：通过多种细胞系模型验证发现，大多数KRAS突变体（如G12V）与NF1存在较强相互作用，并能竞争性抑制NF1对野生型RAS的负调控，从而以不依赖于EGFR的方式持续驱动RAS信号。而KRAS G13D突变体与NF1的相互作用较弱，无法有效解除NF1的抑制作用。因此，在携带G13D突变的肿瘤细胞中，野生型RAS的活化仍然部分受控于上游EGFR信号，这使得西妥昔单抗通过阻断EGFR仍能发挥一定的抗肿瘤效应。

该项研究不仅解释了KRAS G13D的独特临床表型，也强调了基于特定突变亚型进行精细化分层的必要性，为优化结直肠癌靶向治疗策略提供了科学依据。

三、靶向KRAS G13D的创新路径：PROTAC蛋白降解策略
尽管对西妥昔单抗敏感，但KRAS G13D作为明确的致癌驱动突变，其直接靶向清除仍具有重要治疗价值。考虑到G13D缺乏共价结合位点，开发高活性非共价抑制剂面临挑战。在此背景下，蛋白降解靶向嵌合体技术为代表的事件驱动型策略展现出独特优势。KRAS[G13D] / CRBN PROTAC试剂盒正是基于该策略开发的研究工具。

1. 作用原理：该试剂盒中的PROTAC分子能够同时与KRAS G13D突变蛋白和E3泛素连接酶CRL4^CRBN（其底物受体为CRBN）结合，形成稳定的三元复合物。这引导E3连接酶对KRAS G13D进行泛素化修饰，进而标记其被蛋白酶体降解。

2. 策略的潜在优势：
- 克服"不可成药性"：PROTAC不依赖于长时间占据高亲和力结合口袋，对靶蛋白的亲和力要求相对较低，为直接靶向缺乏理想药物结合位点的KRAS G13D提供了可能。
- 根除蛋白功能：通过直接降解致癌蛋白，可从源头消除其所有功能（包括GTP酶依赖和非依赖功能），可能比仅仅抑制GTP结合更为彻底。
- 潜在克服耐药：对于因信号反馈或旁路激活导致的耐药，清除靶点蛋白可能比抑制其活性更为有效。

3. 研究应用价值：利用KRAS[G13D] / CRBN PROTAC试剂盒，研究人员可以：
- 在细胞模型中验证诱导KRAS G13D特异性降解的可行性及效率。
- 评估蛋白降解对下游MAPK等信号通路、细胞增殖与存活的影响。
- 探索与现有EGFR抑制剂（如西妥昔单抗）的联合治疗潜力，验证是否可产生协同效应或克服耐药。

KRAS突变异质性对靶向治疗的影响及G13D靶向新策略-南京优爱(UA BIO), 重组蛋白专家