一、仪器组成
Nanoject III 主要由 控制主机(Control Box)、注射头(Injector Head)、数据连接线、电源适配器、脚踏开关(选配) 组成。
二、操作前准备
1. 仪器组装与连接
- 将黑色数据连接线一端插入注射头顶部接口,另一端插入控制主机右侧的 HEAD 端口Drummond Scientific。
- 若使用脚踏开关,将其线缆插入控制主机右侧的 FOOTSWITCH 端口Drummond Scientific。
- 将电源适配器连接至控制主机左侧电源接口,并接通 100-240V 交流电源。
- 打开控制主机左侧的 电源开关(ON/OFF),屏幕显示 Drummond Logo 后进入自检,注射头柱塞自动回位(HOME),自检完成后进入主操作界面。
2. 玻璃毛细管(针头)准备
- 选用适配的 Drummond 专用玻璃毛细管(Nanoject 针),确保针尖完好、无堵塞、无气泡。
- 准备 轻质矿物油(Mineral Oil) 用于毛细管回填(标准流程)Drummond Scientific。
3. 样品准备
将待注射样品(DNA、RNA、试剂等)置于离心管或样品皿中,确保无气泡、无杂质。
三、详细操作步骤
第一步:安装玻璃毛细管(手动模式)
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拧松注射头前端的黑色夹头(Collet)Drummond Scientific。
用微量注射器将矿物油 ** 回填(Backfill)** 至玻璃毛细管内部,确保无气泡Drummond Scientific。
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将毛细管平稳套入注射头的金属柱塞,直至底部卡紧,然后拧紧黑色夹头固定Drummond Scientific。
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点击手动界面的 [EMPTY](排空),排出毛细管尖端多余矿物油,直至尖端出现均匀液滴、无气泡。
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点击 [HOME],使柱塞自动复位至初始位置。
点击 [EXIT] 返回主界面Drummond Scientific。
第二步:吸取样品(手动填充)
- 返回主界面,再次进入 [MANUAL] 模式。
- 将毛细管尖端浸入样品液面以下。
- 点击 [FILL](填充),柱塞回缩,样品被缓慢吸入毛细管尖端。
- 建议:低速间歇操作(按 FILL 2-3 秒 → STOP → 重复),避免气泡产生。
- 吸样量:略大于计划注射总量(预留缓冲)。
- 吸样完成后,点击 [HOME] 复位,[EXIT] 返回主界面。
第三步:设置注射参数(注射模式)
- 主界面点击 [INJECT](注射模式)。
- 设置核心参数(触屏 ± 调节):
- 注射体积(Volume):0.6 ~ 999.9 nL(精度 0.1 nL)。
- 注射速率(Rate):1 ~ 200 nL/sec(常规 10~50 nL/sec)。
- 可选:开启 [ASP](回吸功能),注射后微量回吸防止样品回流。
- 可选:注射计数器(Counter) 自动记录次数,可手动重置。
第四步:执行显微注射
- 通过显微操作仪将毛细管尖端精准定位至靶标(细胞 / 胚胎 / 组织)。
- 两种触发方式(二选一):
- 触屏:点击 [INJECT] 图标。
- 脚踏:踩下脚踏开关(更常用,解放双手)。
- 系统按设定体积、速率自动完成注射,完成后发出提示音。
- 缓慢退出针尖,更换样本重复操作。
第五步:程序模式(多步 / 循环注射,进阶)
如需多次、变速、间隔注射(如胚胎连续注射),使用 [PROGRAM] 模式:
- 主界面 → [PROGRAM] → [NEW] 新建程序Drummond Scientific。
- 依次设置:
- 第一步:注射体积、速率 → [NEXT]
- 第二步:循环次数(Cycles)→ [NEXT]
- 第三步:循环间隔(Delay,秒)→ [SAVE]
- 保存后点击 [RUN] 执行,界面显示进度;可 [PAUSE] 暂停。
- 程序完成后三声提示音。
第六步:实验结束与维护
- 操作完毕:
- 进入 [MANUAL] → [EMPTY],排空剩余样品与矿物油。
- 用乙醇或去离子水反复冲洗毛细管(或直接更换新针)。
- 关机:
- 点击 [HOME] 复位柱塞。
- 关闭主机电源开关,拔掉电源线与数据线。
- 清洁:
- 擦拭注射头与主机表面,避免液体渗入接口。
- 长期不用:取出毛细管,干燥保存。
四、关键注意事项
- 气泡杜绝:全程矿物油与样品中严禁气泡,否则注射量失准Drummond Scientific。
- 针尖保护:安装、操作、清洁时严禁磕碰针尖,破损立即更换。
- 速度匹配:粘稠样品(如 DNA 溶液)用低速(<20 nL/sec),避免堵塞。
- 夹头松紧:固定毛细管时适度拧紧,过松漏液、过紧夹碎玻璃Drummond Scientific。
- 校准建议:新针 / 长期未用可先用染料测试注射量,确认精准后正式实验。