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小鼠来源免疫细胞中NK细胞群体的特性鉴定研究

2026-06-23     来源:本站     点击次数:24

生物学背景

NK 细胞(自然杀伤细胞)是固有淋巴细胞的重要组成部分,由骨髓造血干细胞分化发育而成,广泛分布于外周血、脾脏、腹腔、淋巴结等免疫组织器官中,是机体抗病毒感染、抗肿瘤固有免疫应答的核心细胞成分。

关于NK1.1和CD49b的选择要根据小鼠的品系:NK1.1:表达在C57BL, FVB/N, NZB, 但在AKR, BALB/c, CBA/J, C3H, C57BR, C58, DBA/1, DBA/2, NOD, SJL, 129中不表达。CD49b:由于还会表达在胸腺上皮细胞、B细胞、单核细胞等中,在用于NK鉴定时,更推荐抗原克隆位点为DX5的抗体,特异性会更强,基本所有小鼠品系都表达,但在NOD中不表达。

实验信息

样本类型

Murine spleen, lung, liver, skin, intestinal tract and tumor

方案类型

Multicolor panel

实验方案

surface marker staining

使用仪器

Attune NXT Flow Cytometer

细胞亚群

NK Cell


配色方案
Mouse NK Cell Panel Kit(CD45+CD3+CD49B)

指标

荧光素

克隆号

货号

指标意义

CD45

APC-Cy7

30-F11

S0N0002

白细胞

CD3

FITC

S-R491

S0N0002

T 细胞

CD49b (DX5)

APC

DX5

S0N0002

NK 细胞

活死染料

BV421

/

S0B88801

区分死活细胞

Mouse NK Cell Panel Kit(CD45+CD3+NK1.1)

指标

荧光素

克隆号

货号

指标意义

CD45

APC-Cy7

30-F11

S0N0014

白细胞

CD3

FITC

S-R491

S0N0014

T 细胞

NK1.1

APC

S-428-32

S0N0014

NK 细胞

活死染料

BV421

/

S0B88801

区分死活细胞

逻辑设门图&数据结果说明

圈门逻辑
数据结果
小鼠脾脏-流式分型结果
C57 Mouse spleen验证数据(CD45/CD3/CD49b)
C57 Mouse spleen验证数据(CD45/CD3/NK1.1)
小鼠肺脏-流式分型结果
C57 Mouse lung验证数据(CD45/CD3/CD49b)
C57 Mouse lung验证数据(CD45/CD3/NK1.1)
小鼠肝脏-流式分型结果
C57 Mouse liver验证数据(CD45/CD3/CD49b)
C57 Mouse liver验证数据(CD45/CD3/NK1.1)
小鼠皮肤-流式分型结果
C57 Mouse skin验证数据(CD45/CD3/CD49b)
C57 Mouse skin验证数据(CD45/CD3/NK1.1)
小鼠肠道-流式分型结果
C57 Mouse 肠验证数据(CD45/CD3/CD49b)
C57 Mouse 肠验证数据(CD45/CD3/NK1.1)
小鼠肿瘤-流式分型结果
小鼠B16肿瘤验证数据(CD45/CD3/CD49b)

使用 3 色多色方案对小鼠来源免疫细胞中的 NK 细胞群体进行特性鉴定研究。

取自小鼠组织单细胞悬液开展代表性分析。首先通过 FSC-A 和 SSC-A 圈取主要细胞群,然后根据光散射特性去除细胞黏连得到单细胞;可搭配固定化活死染料圈出活细胞,在活细胞门内,通过 CD45⁺鉴定全部免疫细胞,再通过 CD3⁻剔除 T 细胞干扰群体,最终依靠 CD49b⁺标记识别 NK 细胞。(CD45⁺CD3⁻NK1.1+/CD49b⁺)。在适配3激光15色Attune nxt流式细胞仪上采集样本,使用 Flowjo v10 软件进行数据分析。
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