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Co-IP蛋白互作实验的检测原理、优势与试剂选择

2026-06-25     来源:本站     点击次数:24

一、蛋白互作研究的经典方法:Co-IP 免疫共沉淀
在蛋白质功能与机制研究中,蛋白 - 蛋白相互作用是解析信号通路、生理病理过程的核心切入点。免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,简称 Co-IP) 是目前应用最广泛的体内蛋白互作验证技术,也是分子生物学、细胞生物学研究的基础实验手段。

Co-IP 实验的核心原理
Co-IP 实验基于两大特异性结合体系:
1,靶蛋白与对应抗体的抗原 - 抗体特异性结合
2,抗体 Fc 段与 Protein A/G 的特异性亲和结合。
实验流程为:在保持蛋白天然构象的细胞 / 组织裂解液中,加入靶蛋白特异性抗体,抗体与靶蛋白结合后,可同步富集与靶蛋白存在生理互作的其他蛋白;加入 Protein A/G 琼脂糖珠作为固相载体,通过结合抗体将整个蛋白复合物沉淀分离;经过洗涤去除非特异性结合蛋白后,洗脱复合物即可通过 WB、质谱等方式完成互作蛋白的鉴定与验证。

Co-IP 的核心优势
可检测生理状态下的蛋白互作,更接近体内真实情况;
实验流程成熟,结果认可度高,是蛋白互作验证的金标准方法之一;
既可验证已知蛋白的互作关系,也可用于筛选未知互作蛋白。
 

二、Co-IP 实验的关键试剂:Protein A/G 琼脂糖珠
Protein A/G 琼脂糖珠是 Co-IP 实验中负责捕获抗体 - 蛋白复合物的核心固相载体,其性能直接决定实验的富集效率、特异性与背景干净程度。
相比单一的 Protein A 或 Protein G 填料,Protein A/G 混合型琼脂糖珠 是更通用的选择:
抗体结合谱更广:可识别不同物种、不同 IgG 亚型的抗体,覆盖绝大多数科研常用抗体,无物种使用限制;
抗体结合载量更高:同等体积填料可结合更多抗体,提升靶蛋白复合物的富集效率;
非特异性吸附低:优质的琼脂糖基质与配基修饰,可有效降低杂蛋白结合,降低实验背景,提升结果信噪比。

三、Santa Cruz Protein A/G 琼脂糖珠:高性价比 Co-IP 实验选择
Santa Cruz(圣克鲁斯)是全球知名的抗体与免疫试剂品牌,其 Protein A/G 琼脂糖珠是科研领域口碑广泛的经典产品,适配 Co-IP、IP 等各类免疫沉淀实验,核心特点如下:
1,高文献认可度:累计 SCI 文献引用超 14000 篇,实验性能经过大量研究验证,数据可重复性强;
2,通用型适配:Protein A/G 双配基设计,可结合所有物种的抗体,以及所有能被蛋白 A/G 识别的 IgG 亚型,适配不同物种、不同靶点的实验体系;
3,高性能表现:具备高抗体载量与高结合特异性,既能高效富集低丰度靶蛋白,也能有效控制非特异性背景,提升实验结果准确性;
4,多场景适用:除免疫共沉淀(Co-IP)外,还可用于常规免疫沉淀(IP)、蛋白纯化等多类实验场景。
名称 货号 规格
Protein A/G PLUS-Agarose sc-2003 2ml
免疫(共)沉淀(IP/CoIP)试剂盒(磁珠法) abs9649-10T 10T
免疫(共)沉淀(IP/CoIP)试剂盒 abs955-50T 50T
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