E-Pro 4 免染实时电泳成像技术原理简介
大多数蛋白质都含有芳香族氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等),因此,在近紫外区有最大吸收峰。
E-Pro 4 采用 275nm紫外光,直接激发蛋白样本,产生 365nm发射荧光,通过专利的滤光和成像技术,捕获发射光信号,在SDS-PAGE凝胶中同步实现蛋白分子的可视化成像和实时监测迁移全过程。另外,发射荧光的光强和蛋白质含量成正相关,可进行蛋白分子的定量分析。
SDS-PAGE蛋白电泳技术及现有检测方法
SDS-PAGE 电泳(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳),可高效分离蛋白质分子,进行定性和半定量分析,是重组蛋白表达验证、抗体药物质控、WB 前置筛查、质谱前样本鉴定、多肽纯度分析的标准实验手段,广泛用于高校科研、药企质检与第三方检测实验室。
SDS-PAGE 电泳的现有检测方法,包括考马斯亮蓝(CBB)染色法、免染预制胶系统两类。
考马斯亮蓝染色法:
酸性条件下,考马斯亮蓝可与蛋白质结合,使其呈现出蓝色。该方法具有检测容易、灵敏度高、染色可逆等特点,但也存在诸多局限:
流程繁琐、耗时长:电泳、染色、脱色、成像,需不同设备操作;染色 1–2 h、脱色过夜,全程需人员值守;
分辨率不足:步骤多、耗时长,易造成条带弥散、检测结果稳定性差,如分子量相近的蛋白难以有效分离,小分子多肽、低丰度蛋白极易损失漏检;
全程无法质控:仅在电泳结束后成像查看结果,样本降解、上样不均等问题无法提前识别,易造成试剂和时间的无效投入;
数据不可溯源:需人工记录实验参数,无完整电泳日志;
有毒试剂:甲醇、冰乙酸等有毒有机试剂。
免染预制胶系统:
凝胶中预混三卤化合物,电泳时可与蛋白质色氨酸残基结合,经紫外激活后产生可见荧光,实现蛋白条带的可视化。免染预制胶无需考染,快速成像,但同样有缺陷:
耗材成本高:需匹配专用预制胶或预制胶试剂盒,试剂成本昂贵;
蛋白结构损伤:电泳结束后需 1–5 min 高强度紫外激活,破坏蛋白的天然构象,处理后凝胶不适于转膜、质谱、活性分析等操作;
终点成像:仅能在电泳结束后成像查看结果,无法质控全过程
几种蛋白检测方法的对比
| 检测方法 |
传统考马斯亮蓝染色 |
免染胶系统检测 |
E-Pro 4免染实时电泳成像检测 |
| 检测原理 |
蛋白电泳后染料染色、脱色
成像查看结果 |
凝胶中预混三卤化合物,电泳结束后,紫外激活成像查看结果 |
利用蛋白芳香族氨基酸紫外吸收特性直接成像
无任何外源试剂 |
| 观测模式 |
终点检测
无法追踪分离过程 |
终点检测
电泳结束后成像,无过程监测 |
电泳全程、动态、实时捕捉图像
可随时终止实验(如异常) |
| 实验时长 |
几小时至过夜 |
1 小时以上 |
最快30-40 分钟 |
| 试剂耗材 |
自灌胶/通用预制胶
消耗大量染色、脱色试剂 |
专用预制胶、试剂盒
试剂价格高 |
兼容自灌胶,提供预制胶,无专用试剂 |
| 样本损耗风险 |
耗时长,步骤多
小分子多肽易丢失损耗 |
分钟级紫外照射激活
易破坏蛋白结构,影响下游杂交等操作 |
蛋白无标记检测
毫秒级瞬时紫外激发,不干扰下游实验 |
| 数据溯源 |
无自动记录,人工归档 |
无自动记录,人工归档 |
自动存储电压、电流、成像时序、样本信息
全流程日志可导出溯源 |
| 人力投入 |
全程人工值守
多步骤操作 |
全程人工值守
电泳后人工切换成像 |
上样后全自动运行
无需人工干预 |
E-Pro 全自动蛋白质电泳成像分析仪产品介绍

上海融萦科技的E-Pro 4 全自动蛋白质电泳成像分析仪,利用蛋白质中芳香族氨基酸在近紫外区有最大吸收峰的特性,采用275nm紫外光直接激发蛋白样本,产生 365nm发射荧光,通过专利的滤光和成像技术,捕获发射光信号,实现对蛋白样本的电泳、免染实时成像、分子量鉴定及含量/纯度分析,适配所有常规蛋白、多肽、抗体样本检测需求。
E-Pro 4 的核心特点如下:
一体化高度整合:一台设备完成蛋白垂直电泳、免染实时凝胶成像和数据分析全流程操作,极大简化实验流程;
高灵敏度,高分辨率:检测灵敏度达 5ng,线性覆盖 25–10000ng 宽动态范围;AI智能凝胶算法,有效分离分子量接近的组分,自动计算分子量、条带纯度、蛋白浓度、峰面积、分辨率,结果一键导出 Excel,满足科研与药企的定量和质控需求;
无损免染,适配下游实验:蛋白无标记、无损伤,依靠蛋白内源的紫外吸收直接成像,可用于 WB、质谱、蛋白活性、多肽测序等后续分析;
步骤少,省时省力:免染色,免脱色,可将传统数小时的实验缩短至 30min 完成,大幅提升实验效率;
通量灵活,操作极简:4 组独立的电泳通道,灵活组合使用,支持用户自灌胶,降低使用成本;上样后无需人工值守,自动记录电泳电压、电流、拍摄时间、成像参数等,自动存储胶图信息,支持数据溯源。
E-Pro 全自动蛋白质电泳成像分析仪的应用
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全蛋白样本的分离,可用于质谱、WB前的样本质控检测
图 1:心肌细胞总蛋白电泳过程实时成像
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小分子多肽片段鉴定分析:小分子多肽片段在考马斯亮蓝染色、脱色过程中容易丢失,或由于浓度过低而无法检出。E-Pro 免染色免脱色,大大降低小片段多肽的丢失风险,保证样本有效检出
E- Pro 4实时成像
人工 考马斯亮蓝染色成像
图 2:小片段多肽鉴定分析:司美格鲁肽,分子量 4.1kDa
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蛋白质控,纯度分析,蛋白质检事半功倍
图 3:E-Pro 实时电泳成像,配合软件纯度分析
E-Pro 4 的应用方向:蛋白制备与全程质控,包括蛋白表达,纯化,样本质控全流程
重组蛋白表达优化:原核/真核重组蛋白的表达验证,对比诱导前后条带差异,优化诱导温度、IPTG浓度、诱导时间等参数,确保目的蛋白正常表达;
蛋白纯化质控:全程追踪纯化步骤如目标蛋白位置、纯度变化等,检测蛋白纯度是否达标,排查蛋白降解、杂带污染等问题;
基础蛋白性质分析:蛋白分子量、亚基组成、蛋白聚合状态等分析,完成蛋白组分的分离和评估;
WB 实验前置质控:确认蛋白完整性与上样规范性,验证目的条带、评估蛋白转膜效率;
质谱样本前处理质控:质谱上机前对目的蛋白样本进行鉴定核验,剔除不合格样本,满足质谱检测标准;
E-Pro 4 的应用领域:
蛋白基础科研
组学与系统生物学研究:纯化蛋白样本进行质谱分析、蛋白修饰分析、蛋白微阵列制备、蛋白相互作用等组学检测;
酶学与蛋白功能研究:工业酶筛选、酶制剂制备中酶动力学测定、酶抑制剂筛选、酶活性测定,解析蛋白功能特性;
结构生物学研究:高纯度、高浓度均一的蛋白用于X射线晶体学结构筛选,冷冻电镜、核磁共振等蛋白结构解析实验;
生物医药/工业
抗体与免疫学研究:重组蛋白研发及制备抗原/单抗/双抗/ADC 等治疗性抗体的纯化与质控鉴定;
药物开发与筛选应用:均一的纯化蛋白作为药物筛选靶点,用于高通量筛选、完成体外活性确证、药物-蛋白结合研究;
工业与生物技术应用:纯化胰岛素、生长激素、疫苗抗原等药用蛋白;食品、洗涤行业纯化淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等工业酶;研发ELISA试剂盒、胶体金试纸等诊断试剂所需的纯化抗原/抗体;
实验教学和常规质控
实验教学:通过蛋白分离、纯化、鉴定实验,演示蛋白分离的核心原理;
常规质控:常态化检测蛋白样本是否存在降解、断裂、杂蛋白污染,保障各类蛋白实验数据精准可靠;