做NGS建库,大家最关注的是文库质量和测序数据。但很多人忽略了中间一个关键环节——
PCR扩增酶。
常规PCR酶为单靶标扩增设计,追求的是特异性和准确性。但NGS建库扩增面临的是完全不同的挑战:需要均匀扩增不同片段大小、不同GC含量的复杂文库,还要保证高产率和高保真。
结果就是,常规酶用在建库上经常出现:
Twist TrueAmp Polymerase Mix 就是为解决这些问题而设计的。


✅️产品简介
Twist TrueAmp Polymerase Mix(2X)是Twist Bioscience专为NGS建库扩增研发的即用型预混液,包含工程化校读型热启动DNA聚合酶、DOE优化的缓冲液、dNTPs和专有均一性增强剂。

室温下可逆结合抑制聚合酶,支持自动化平台上的长时程孵育。单管2X预混液,即取即用,操作极简。且与全系列文库制备和靶向富集试剂盒无缝兼容。
适用场景:NGS文库扩增、靶向富集、cfDNA/FFPE样本检测、宏基因组分析、全基因组测序和寡核苷酸池(Oligo pool)扩增等!
✅️核心优势

1. 低偏差扩增,GC 5%-95% 均匀覆盖
常规聚合酶在扩增高GC或低GC区域时容易脱落,导致覆盖不均、数据缺失。TrueAmp 凭借工程化校正聚合酶及DOE优化配方,实现了从5%到95%极端GC含量的无偏倚扩增。
2. 超高灵敏度,最低100fg输入
从100fg到1ng的梯度gDNA文库输入,均能获得稳定扩增产率。在靶向富集等低产率文库场景中表现稳健。
3. 高保真度,C>T错误减少20%
搭载工程化校正阅读(proofreading),C→T碱基替换错误减少20% ,这对FFPE样本中常见的胞嘧啶脱氨损伤尤为重要。
4. 减少滑链,同聚物区域稳定扩增
高持续合成能力,>8个均聚物区域的聚合酶滑移事件大幅减少,完美序列保留率显著提升。
5. 磁珠耐受,纯化不影响扩增效率
在MyOne T1 Beads、M270 Beads和Twist DNA纯化磁珠不同用量测试中,均保持更高的测序reads数,提升工作流程稳健性。
6. 自动化友好,适配体热启动室温稳定
适配体热启动机制在室温下有效阻断聚合酶活性,支持自动化平台长时间放置,组分加样顺序灵活,结果可重复。

✅️性能数据
1. 低偏差扩增:GC 5%-95% 均匀覆盖
在针对AT-rich与GC-rich混合微生物样本的实测中,无论3个循环还是16个循环,Twist TrueAmp Polymerase Mix始终保持均一的覆盖度。即使面对86% GC区域,依然数据完整。
这意味着以前因GC极端而丢失的难捕获靶标,现在都能被稳定检出——测序成本降低,数据利用率飙升。

2. 超高灵敏度:100fg-1ng梯度投入稳定扩增
从100fg到1ng的梯度gDNA文库投入,经酶切、修复、连接后,分别用不同聚合酶扩增。结果显示Twist TrueAmp Polymerase Mix在各浓度梯度均能获得稳定产率,在低产率文库(如靶向富集)场景中表现尤为稳健,数据更干净,文库复杂度更高。

3. 高保真+抗滑链:C>T错误减少20%,同聚物区域稳定
工程化校读聚合酶显著降低胞嘧啶脱氨导致的C>T误掺入。在>700万碱基掺入事件后的替换率测试中表现优异。同时,高持续性聚合酶减少>8bp同聚物片段区域的滑链缺失事件,提升复杂变异检测可信度。

4. 磁珠耐受:纯化不影响扩增效率
NGS文库制备离不开磁珠纯化和分选,但磁珠残留会抑制聚合酶活性,影响PCR产量。
Twist TrueAmp Polymerase Mix表现出了较好的磁珠耐受性。在PCR反应中分别加入6.25μL、12.5μL、25μL和50μL的MyOne T1 Beads、M270 Beads和Twist DNA Purification Beads后,依然维持了极高的产出。


✅️订购信息

储存条件:-20°C(干冰运输)
仅供科研使用,不可用于诊断。

Twist TrueAmp Polymerase Mix拥有国际顶尖的生物技术底蕴,品质稳健可靠。
在多项核心性能指标(GC覆盖广度、磁珠耐受度、自动化适配性)达到行业领先水平的同时,定价策略更具市场亲和力。
用更合理的成本,获得更全面的扩增性能——让实验室做到真正的“降本增效”。
杭州沃森生物技术有限公司是Twist 官方授权代理商,如有Twist 产品需求,欢迎来电交流咨询!
