突破普通 ECL 局限:超敏 ECL 实现低丰度蛋白高灵敏印迹检测
一、什么是超敏型 ECL 化学发光检测试剂盒?
超敏型 ECL 化学发光检测试剂盒包含底物 A 液与过氧化物 B 液,等体积混合后构成工作液。依靠 HRP 辣根过氧化物酶催化鲁米诺衍生物发生氧化反应释放光子,配方优化增强发光增强组分,检测下限可达低皮克级别,发光信号持续时间长,可适配 X 光胶片与 CCD 化学发光成像仪。用于检测印迹膜上 HRP 标记的抗原抗体复合物,适合低丰度蛋白样本,同时可适当提高抗体稀释倍数,节约珍贵抗体试剂。
二、与普通 ECL 试剂盒相比具备哪些技术差异?
普通 ECL 适合高丰度蛋白,灵敏度为纳克中等皮克级,抗体使用浓度偏高;超敏型ECL化学发光检测试剂盒通过优化底物与增强剂体系,灵敏度得到提升,信号持续时间更长,允许更高倍数稀释一抗、二抗,节约抗体成本。普通 ECL 遇到低表达靶标容易条带微弱甚至无信号;超敏 ECL 对微量样本、磷酸化修饰蛋白检测更友好。缺点是高浓度抗体易带来非特异性背景,实验需要做好洗膜流程,搭配内参蛋白开展半定量分析。
三、超敏型 ECL 试剂盒适用于哪些科研实验?
超敏型ECL化学发光检测试剂盒仅用于科研,不可用于临床诊断,适配 PVDF、NC 印迹膜。主要用于 Western Blot 检测低丰度总蛋白、磷酸化等翻译后修饰蛋白;可用于 CoIP 免疫共沉淀产物检测、DotBlot,也支持化学发光 ELISA 实验。A 液 B 液必须现配现用,孵育印迹膜过程避免膜干燥;洗膜步骤需要充分,降低非特异背景,可结合 CCD 成像系统采集图像,完成蛋白半定量分析,适合样本来源有限的珍贵标本研究。

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